[发明专利]一种Etelcalcetide的合成方法及其应用

说明书

一种Etelcalcetide的合成方法及其应用，属于药物合成技术领域。本发明包括以下步骤：(1)液相合成Fmoc‑D‑Ala‑D‑Arg(Pbf)‑OH二肽片段1；(2)液相合成Fmoc‑D‑Arg(Pbf)‑D‑Arg(Pbf)‑OH二肽片段2；(3)依次偶联氨基酸：二肽片段1、二肽片段2、二肽片段1、N‑Ac‑D‑Cys(Mmt)‑OH，获得片段A；(4)脱除片段A中Cys(Mmt)的保护基，获得片段B，再与Boc‑Cys(Npys)‑OH偶联后，裂解获得Etelcalcetide粗品。本发明可以应用于亲水性、疏水性多肽、长链多肽的直接修饰同时可以在有机溶剂中进行。

技术领域

本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种Etelcalcetide的合成方法及其应用。

背景技术

继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)是由于钙磷代谢异常、维生素D缺乏或肾功能损害引起的甲状旁腺增生，血甲状旁腺激素升高，进而加重骨骼损害的疾病。目前治疗SHPT的措施包括积极控制诱发SHPT的原发病，限制饮食中磷的摄入，必要时才有磷结合剂、活性维生素D类似物。同时拟钙剂能有效治疗SHPT。

依特卡肽(Etelcalcetide)是一种用于治疗接受血液透析患者SHPT的拟钙药。在每次透析期结束时静脉注射给药。其通过结合并激活甲状旁腺中的钙敏感受体(CaSR)作为变构激活剂起作用，抑制并减少甲状旁腺素的分泌，从而达到可以治疗SHPT的目的。该药也是首个在患者每次透析结束后每周三次静脉注射给药的静脉注射型拟钙剂。中重度甲状旁腺功能亢进血液透析患者接受维拉卡肽治疗后，PTH水平显著降低。Etelcalcetide是一种仿钙剂，可对钙敏感受体(CaSR)进行变构调节。Etelcalcetide主链由4个D型Arg、2个D型Ala以及乙酰化D型Cys共7个D型氨基酸组成，同时侧链通过二硫键与L-半胱氨酸相连，得到Etelcalcetide。Etelcalcetide结构如图1所示，肽序如图2所示。

国内外对Etelcalcetide的合成已有报道，如公开号为CN105504012 A、CN106928320、CN109280078B、CN110668984A、CN110498835A以及CN110054662A的专利均采用固相合成Etelcalcetide。虽然固相偶联过程操作过程简单、便于自动化生产、产品收率较高以及产品易分离的优点，但是偶联过程中需要使用树脂，为保证偶联完全，氨基酸的投料倍数通常需要过量(3-5当量)，加上Etelcalcetide主链均为D型氨基酸，价格相对常规氨基酸来说，比较昂贵。因此，采用固相合成方法，成本过高，在生产上规模化受到限制。

公开号为CN106928321、WO2016154580A1、CN111925418A的专利均采用液相合成Etelcalcetide。液相合成的方法在适合大规模生产、氨基酸用量较少，达到控制成本的目的。但是反应后处理操作繁杂、难溶性肽合成较困难、总收率相对较低，并且在液相中形成多肽链间二硫键，会出现二硫键错配问题，副反应和副产物的种类较多，收率和纯度都不理想，进一步减低产品收率。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种Etelcalcetide的合成方法及其应用。本发明利用液相载体方法合成Etelcalcetide合成以及使用两个二肽片段提高合成效率和减少缺损杂质。本发明结合了固相合成和液相合成的优点，达到了操作简单、减低成本、减少缺损杂质的产生以及适合规模化生产的目的。并且可操作性好，杂质减少的效果良好，同时也提高了收率，降低了成本，适合规模化生产。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取氨基酸置于溶剂中进行偶联和重结晶，液相合成Fmoc-D-Ala-D-Arg(Pbf)-OH二肽片段；