[发明专利]一种Etelcalcetide的合成方法及其应用

权利要求书

1.一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取氨基酸和化合物置于溶剂中形成偶联体系进行偶联反应后重结晶，液相合成Fmoc-D-Ala-D-Arg(Pbf)-OH二肽片段；

(2)取氨基酸和化合物置于溶剂中形成偶联体系进行偶联反应后重结晶，液相合成Fmoc-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-OH二肽片段；

(3)以Dpm-NH₂为液相合成载体，以氯仿为反应溶剂，依次偶联以下氨基酸：上述步骤(1)合成的Fmoc-D-Ala-D-Arg(Pbf)-OH、上述步骤(2)合成的Fmoc-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-OH、上述步骤(1)合成的Fmoc-D-Ala-D-Arg(Pbf)-OH、N-Ac-D-Cys(Mmt)-OH，获得N-Ac-D-Cys(Mmt)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-Dpm-NH₂，即片段A，结构式如下式1；

(4)采用1％TFA/CHCl₃溶液脱除片段A中Cys(Mmt)的保护基，获得N-Ac-D-Cys(SH)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Arg(Pbf)-D-Ala-D-Arg(Pbf)-Dpm-NH₂，即片段B，再与Boc-Cys(Npys)-OH偶联后，裂解获得Etelcalcetide粗品。

2.如权利要求1所述的一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于所述步骤(1)和步骤(2)中溶剂包括NMP、THF、DCM、ACN和DMF中的一种或多种，所述偶联体系包括DIC/HONb/有机碱、DCC/HONb/有机碱、EDCI/HOSu/有机碱、DCC/HOSu/有机碱、DIC/HONb/无机碱、DCC/HONb/无机碱中的一种或多种，所述重结晶的溶剂体系包括EtOH/H₂O、DCM/Et₂O、THF/Et₂O、EA/Et₂O、MeOH/Et₂O、CH₃CN/Et₂O、EA/PE、THF/PE、CH₃CN/H₂O中的一种或多种。

3.如权利要求2所述的一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于所述有机碱包括DIPEA、三乙胺、N-甲基吗啡啉中的至少一种，优选有机碱为DIPEA，所述无机碱包括Na₂CO₃或NaHCO₃中的至少一种，优选无机碱为NaHCO₃。

4.如权利要求2所述的一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于所述步骤(1)中溶剂为DCM，所述偶联体系为DIC/HONb/有机碱，所述重结晶的溶剂体系为EtOH/H₂O。

5.如权利要求2所述的一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于所述步骤(2)中溶剂为DCM，所述偶联体系为DIC/HONb/有机碱，所述重结晶的溶剂体系为EA/PE。

6.如权利要求1所述的一种Etelcalcetide的合成方法，其特征在于所述步骤(3)中氨基酸与Dpm-NH₂的摩尔比为1:1～3:1，优选氨基酸与Dpm-NH₂的摩尔比为1.1:1～1.3:1，所述偶联采用的偶联剂包括EDCI//HOBt、DIPCDI/HOBt、PyBop/HOBt/DIPEA、HBTU/HOBt/DIPEA、DIPCDI/HOAt、HATU/HOAt/DIPEA和PyAop/HOAt/DIPEA中的一种或多种，优选偶联采用的偶联剂为EDCI//HOBt。