[发明专利]一株高产Levan果聚糖的产左聚糖微杆菌及Levan果聚糖的应用

说明书

本发明公开了一株高产Levan果聚糖的产左聚糖微杆菌及Levan果聚糖的应用。所述菌株分类命名为产左聚糖微杆菌（Microbacteriumlaevaniformans）CN‑01，于2020年12月11日保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.21356。Levan果聚糖由产左聚糖微杆菌（M.laevaniformans）CN‑01发酵而得，经发酵条件优化后，Levan果聚糖的产量达到35.2 g/L。实验证明，所述的由CN‑01分泌的Levan果聚糖具有良好的减脂功能，在减肥食品领域由良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别涉及一种高产Levan果聚糖的产左聚糖微杆菌及Levan果聚糖的应用。

背景技术

Levan果聚糖是一类典型的果糖聚合物。不同来源及不同分子量的Levan果聚糖具备丰富的生物学功能。比如来源于M. laevaniformans的Levan（Mw=710 kDa）和来源于Zymomonasmobilis的Levan（Mw=570 kDa）对肉瘤180细胞有较强的抑制作用，而Gluconoacetobacterxylinus产生的Levan（Mw=40 kDa）的抑制效果却显著降低。低分子量的Levan果聚糖则可抑制腐败菌和致命菌的存活率。此外，研究人员从不同蜂蜜中分离得到多株产Levan的Bacillus subtilis，其中来自菌株K、M、E的Levan可抑制致病性禽流感病毒HPAI和H5N1的活性，而菌株A、M的Levan对40型腺病毒有抑制活性。

除了微生物来源的Levan，它还存在于植物中。植物来源的levan主要存在于草本植物，但是其天然含量低，提取和分离成本高，不适于产业化生产。微生物发酵液提取和酶法合成是目前大量获得Levan果聚糖的两种方法，其中微生物发酵液提取的Levan果聚糖产量和蔗糖转化率一般较低，且发酵液中同时存在的其他高聚物不利于Levan的规模化纯化；而酶法制备虽然产量高，但由于是体外反应，存在天然缺陷，即分子量低。比如2016年江南大学的硕士论文《Bacillus amyloliquefaciensH47果聚糖蔗糖酶基因的克隆、表达及其应用研究》中，酶法制备的Levan果聚糖分子量仅为 7.5 kDa，因此，筛选一株高产Levan果聚糖的菌株对于其商业化应用至关重要。

发明内容

本发明的目的是拓展高产Levan果聚糖的微生物资源，同时提供一种Levan果聚糖的应用。

为实现上述目的，现提供以下技术方案：

一株高产Levan果聚糖的产左聚糖微杆菌，分类命名为产左聚糖微杆菌（M.laevaniformans）CN-01，于2020年12月11日保藏至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 21356。

所述菌株M. laevaniformans CN-01筛选于江苏省南京市浦口区珠江镇的水稻田中的水稻根际土壤，使用LB培养基分离得到。

在LB固体培养基上37 ℃培养16-24h观察发现菌落呈浅黄色、光滑、不透明、表面相对平整且边缘规整。

本发明Levan果聚糖的发酵方法按以下步骤进行：

挑取CN-01的单菌落至LB培养基（NaCl 10 g/L，酵母粉 5 g/L，蛋白胨 10 g/L）中，37 ℃，200 rpm，过夜培养；