[发明专利]一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法及应用

说明书

一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法及应用，属于药物纯化技术领域。本发明纯化方法包括：(1)取粗肽，溶解于溶剂中，加入乙腈，过滤后收集样品液；(2)进行两次反相HPLC纯化，收集合格馏分；(3)加入等体积水稀释，以制备柱脱盐，收集脱盐馏分；(4)低温处理并保持温度，调节pH，使目的肽沉淀析出后静置，过滤，真空干燥，得到精肽粉末。本发明CO₂沉淀析出目的肽，即纯化后的合格馏分无需进行减压浓缩或超滤，冷冻干燥等操作，省去旋蒸的耗时，纯化过程简便易行，耗时短，能耗少，可用于规模化、工业化生产，大大降低了生产成本，提高了生产效率。对利拉鲁肽或者索玛鲁肽的纯化馏分均适用，效果显著。

技术领域

本发明属于药物纯化技术领域，具体涉及一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法及应用。

背景技术

糖尿病是一组因胰岛素绝对或相对分泌不足以及胰岛素利用障碍引发机体糖、蛋白质、脂质等一系列代谢紊乱性疾病。糖尿病主要分为特殊类型糖尿病、I型糖尿病和II型糖尿病。我国95％以上的糖尿病患者患有II型糖尿病，该类型的糖尿病患者表现为胰岛素进行性分泌不足和胰岛素抵抗两者兼有。

目前，市场上针对II型糖尿病的降糖药种类很多，包括二甲双胍、磺脲类药物和胰高血糖样肽-1(GLP-1)的受体激动素等，其中利拉鲁肽和索玛鲁肽均是长效的GLP-1受体激动剂，该两种药物是诺和诺德公司通过基因工程菌解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)或酿酒酵母(Saccharom ycescerevisiae)发酵获得，兼具降糖及减肥功效的GLP-1降糖药。

利拉鲁肽的化学表述为Arg ³⁴Lys ²⁶-[N-ε-(γ-Glu-(N-hexadecanoyl))]-GLP-1^7-37，分子式为C₁₇₂H₂₆₅N₄₃O₅₁，相对分子质量3751.2，CAS登记号为204656-20-2，氨基酸序列如下：NH₂-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(N-ε(N-α-Palmitoyl-L-γ-glutamyl))-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-COOH。索玛鲁肽的分子式为C₁₈₇H₂₉₁N₄₅O₅₉，其对应的分子量为4111.1，肽序列结构如下：H-His⁷-Ala⁸-Glu⁹-Gly¹⁰-Thr¹¹-Phe¹²-Thr¹³-Ser¹⁴-Asp¹⁵-Val¹⁶-Ser¹⁷-Ser¹⁸-Tyr¹⁹-Leu²⁰-Glu²¹-Gly²²-Gln²³-Ala²⁴-Ala²⁵-Lys²⁶(AEEA-AEEA-γ-Glu-Octadecanedioic-Acid-Mono-tert-butylester)-Glu²⁷-Phe²⁸-Ile²⁹-Ala³⁰-Trp³¹-Leu³²-Val³³-Arg³⁴-Gly³⁵-Arg³⁶-Gly³⁷-OH。与天然GLP-1相比，该两种药物的药效相当且作用时间更长。