[发明专利]一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法及应用

权利要求书

1.一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取粗肽，溶解于溶剂中，加入乙腈，过滤后收集样品液；

(2)将上述步骤(1)得到的样品液进行两次反相HPLC纯化，收集合格馏分；

(3)将上述步骤(2)得到的合格馏分中加入等体积水稀释，以制备柱脱盐，收集脱盐馏分；

(4)将上述步骤(3)得到的脱盐馏分低温处理并保持温度，加入CO₂至饱和后加纯水调节pH或者加入酸性试剂调节pH，使目的肽沉淀析出后静置，过滤，真空干燥，得到精肽粉末。

2.如权利要求1所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述步骤(1)中溶剂包括碳酸氢铵溶液，所述粗肽与溶剂的质量体积比为1：30～50，所述乙腈的加入量为5％～20％。

3.如权利要求1所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述步骤(2)中反相HPLC纯化的具体操作为：以C18作为制备柱，设置流动相A为A1，流动相B为乙腈，第一次调节pH，控制A1所处密封压力罐的压力，进行第一次反相HPLC纯化30～50min，停止流速，更换洗脱条件，设置流动相A为A2，第二次调节pH，控制A2所处密封压力罐的压力，进行第二次反相HPLC纯化，收集目标馏分，将纯度≥99.0％，单杂≤0.10％作为合格馏分，将90.0％≤纯度≤99.0％的目标馏分再一次回收纯化。

4.如权利要求3所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述A1包括碳酸氢铵、碳酸氢钠中的一种或多种，第一次调节pH至7.3～7.7，控制A1所处密封压力罐的压力为0.1～0.5Mpa，所述第一次反相HPLC纯化的条件：流速为500～600mL/min，洗脱梯度为37％B-42％B，40min，控制流动相A1和B为20～30℃，柱温为20～30℃。

5.如权利要求3所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述A2包括碳酸氢铵、碳酸氢钠中的一种或多种，第二次调节pH为9.3～9.7，控制A2所处密封压力罐的压力为0.1～0.5Mpa，所述第二次反相HPLC纯化的条件为：流速500～600mL/min，采用90％A2+10％B冲洗10min，进行梯度洗脱，洗脱梯度为35％B-45％B，100min，控制流动相A2和B为20～30℃，柱温为20～30℃。

6.如权利要求1所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述步骤(3)中制备柱脱盐的方法为：设置流动相A为纯水，流动相B为乙腈，全部上样后以90％A+10％B冲洗15min，以20％B-80％B，30min梯度洗脱，收集脱盐馏分。

7.如权利要求1所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述步骤(4)中低温处理的温度为-5℃～10℃，调节pH至2.0～6.0，优选pH值为4.0～6.0。

8.如权利要求1所述的一种利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法，其特征在于所述步骤(4)中所述酸性试剂包括碳酸、甲酸、乙酸、磷酸、盐酸、硫酸和高氯酸中的一种或多种，优选酸性试剂为碳酸。

9.通过如权利要求1-8任一所述的利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法制备得到的利拉鲁肽或索马鲁肽。

10.如权利要求1-8任一所述的利拉鲁肽/索马鲁肽的纯化方法在大量、精细制备利拉鲁肽/索马鲁肽中的应用。