[发明专利]一种检测MTHFR基因多态性的引物组及试剂盒

权利要求书

1.一种检测MTHFR基因多态性的引物组，其特征在于，所述引物组包括以下中的一对或多对引物：

1)第一引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的MTHFR 677C上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的MTHFR 677C下游引物；

2)第二引物对：包括核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的MTHFR 677T上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的MTHFR 677T下游引物。

2.一种检测MTHFR基因多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括PCR反应物和质控品，所述PCR反应物包括第一反应物和第二反应物，所述第一反应物包括权利要求1所述引物组中的第一引物对，第二反应物包括所述权利要求1所述引物组中的第二引物对。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述第一反应物还包括MTHFR 677C探针、内参基因引物对和内参基因探针中的一种或多种；和/或，第二反应物还包括MTHFR677T探针、内参基因引物对和内参基因探针中的一种或多种。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述MTHFR 677C探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，和/或，所述MTHFR 677T探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；优选的，所述MTHFR 677C探针和MTHFR 677T探针的一端修饰有荧光基团，另一端修饰有淬灭基团。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述第一反应物和第二反应物中的内参基因引物对的序列相同，所述内参基因引物对包括核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示的上游引物，和核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示的下游引物。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述第一反应物和第二反应物中的内参基因探针的序列相同，所述内参基因探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；优选的，内参基因探针的一端修饰有荧光基团，另一端修饰有淬灭基团；更优选的，所述内参基因探针与MTHFR 677C探针、MTHFR 677T探针的荧光基团不同。

7.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述第一反应物和第二反应物均还包括下述之一：a)DNA聚合酶、PCR缓冲液、dNTP混合物和水性介质的混合液；b)Master MIX。

8.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品包括阳性质控品和阴性质控品；优选的，所述阳性质控品包括第一阳性质控品和第二阳性质控品；所述第一阳性质控品包括MTHFR 677C阳性质粒和内参基因阳性质粒，所述第二阳性质控品包括MTHFR 677T阳性质粒和内参基因阳性质粒。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述内参基因阳性质粒中内参基因选自人β-actin、GAPDH或18s-rRNA；和/或，所述阴性质控品为无核酸酶水或TE缓冲液。

10.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括核酸释放剂；优选的，所述核酸释放剂选自十二烷基硫酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚或氢氧化钠中的一种或多种。