[发明专利]一株分泌抗乙螨唑单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

权利要求书

1.一株分泌分泌抗乙螨唑单克隆抗体杂交瘤细胞株，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称单克隆细胞株AZX，保藏编号为CGMCC No.45015，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

2.一种抗乙螨唑单克隆抗体，其特征在于，由权利要求1所述保藏编号为CGMCCNo.45015的单克隆细胞株AZX分泌产生。

3.一种抗乙螨唑半抗原，其特征在于，所述抗乙螨唑半抗原为带羧基的乙螨唑衍生物，结构如下式(Ⅰ)所示：

4.一种如权利要求3所述的抗乙螨唑半抗原的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、化合物1即1-叔丁基-3-甲氧基苯溶于二氯甲烷，冷却至-5～0℃，加入氯乙酰氯、无水氯化铝，反应后经萃取分离得黄色油状化合物2；

S2、室温下，化合物2溶于乙醇水溶液，加入甲酸钠搅拌反应，除去溶剂，得淡白色固体化合物3；

S3、化合物3溶于乙酸钠的甲醇溶液，加入盐酸羟胺，加热至50℃～60℃保持2-4小时，冷却至室温并浓缩，萃取浓缩得到淡黄色固体化合物4；

S4、化合物4溶于乙醇和四氢呋喃，加入催化剂，氢化，滤除催化剂，得浅棕色固体化合物5；

S5、化合物5、三乙胺溶于四氢呋喃中冷却并搅拌，加入4-溴-2,6-二氟苯甲酰氯，室温下搅拌5-8小时，过滤浓缩得棕色固体化合物6；

S6、化合物6、亚硫酰氯溶于苯，油浴搅拌回流2-4小时，然后经浓缩、过滤得到无色固体化合物7；

S7、化合物7、乙酸钯和2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基-1,1'-二联苯溶于脱气四氢呋喃，室温和氮气下搅拌，加入4-溴丁酸乙酯的四氢呋喃溶液，50-60℃下搅拌5-8小时，萃取收集有机相，层析后得到白色固体化合物8；

S8、化合物8溶于THF水溶液，加入NaOH，室温下搅拌12-18h，浓缩后酸化至pH为2-3，萃取有机层，纯化得到呈灰白色固体状的目标化合物，即为所述抗乙螨唑半抗原。

5.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S1中，化合物1与氯乙酰氯的质量比为20：15.21。

6.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述乙醇水溶液中乙醇与水的体积比为7：3，加入甲酸钠，80-100℃搅拌12-18小时。

7.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S4中，所述催化剂包括钯碳，所述氢化为在室温下和大气压下氢化18-24小时。

8.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S5中，化合物5、三乙胺及4-溴-2,6-二氟苯甲酰氯的质量比为4.5：2.88：6.3。

9.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S6中，化合物6、亚硫酰氯的质量比为3.5：4.87。

10.一种如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤S7中，化合物7、乙酸钯和2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基-1,1'-二联苯的质量比为1.5：269：550，所述4-溴丁酸乙酯的四氢呋喃溶液的浓度为0.6mol/L。

11.一种抗乙螨唑完全抗原，其特征在于，所述抗乙螨唑完全抗原的结构式如下式(Ⅱ)所示：