[发明专利]guaA基因、质粒、菌株在表达固氮菌嗜铁素中的应用在审
| 申请号： | 202111620877.7 | 申请日： | 2021-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN114350688A | 公开（公告）日： | 2022-04-15 |
| 发明（设计）人： | 陈云鹏;冯保云;章梦婷 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C12N15/74;C12N1/21;C12P1/04;C12R1/065 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | guaa 基因 质粒 菌株 表达 固氮菌 嗜铁素 中的 应用 | ||
1.一种目的基因在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述目的基因为guaA基因，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种质粒在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述质粒包含guaA基因，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求2所述的一种质粒在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述质粒为pET28a(+)-guaA。
4.一种菌株在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述菌株包含含有guaA基因的质粒，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
5.根据权利要求4所述的一种菌株在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述菌株为包含pET28a(+)-guaA的GXGL-4A；
所述GXGL-4A制备感受态细胞的方法包括以下步骤：
(1)普通LB培养基过夜培养带荚膜细菌，活化细菌；
(2)再以1％接种量接种于含有7.5g/L CaCl2的培养基中培养到对数期；
(3)低温下离心收集细菌沉淀，PEB电击缓冲液洗去杂质和菌体碎片，得到细菌感受态细胞。
6.根据权利要求4所述的一种菌株在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，在菌株培养时，添加IPTG诱导。
7.根据权利要求6所述的一种菌株在表达固氮菌嗜铁素中的应用，其特征在于，所述IPTG的浓度为15-25mg/L。
8.一种目的基因在制备高产嗜铁素固氮菌菌剂或产嗜铁素的促生菌菌剂中的应用，其特征在于，所述目的基因为guaA基因，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
9.一种质粒在制备高产嗜铁素固氮菌菌剂或产嗜铁素的促生菌菌剂中的应用，其特征在于，所述质粒guaA基因，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
10.一种菌株在制备高产嗜铁素固氮菌菌剂或产嗜铁素的促生菌菌剂中的应用，其特征在于，所述固氮菌包含含有guaA基因的质粒，所述guaA基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
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