[发明专利]一种多功能肠道诊疗制剂制备方法及其产品

权利要求书

1.一种多功能肠道诊疗制剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）壳聚糖纳米粒的制备

取30 mg 壳寡糖、17mg乙二酸四乙胺（EDTA）溶于10mL去离子水中，再加入2-5 mg金纳米棒，超声分散均匀；在磁力搅拌下逐滴添加无水乙醇直至体系颜色变为乳光色，加入30μL25%的戊二醛溶液交联4h，离心收集纳米球；取100μL靶向抗体溶于10mL去离子水中，加入12mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）和8mg N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）于室温下活化抗体羧基2-4h；向反应体系加入10-15mg纳米球，搅拌4h后离心收集，使用去离子水清洗三次除去未反应的抗体，获得壳聚糖纳米粒产物；

（2）含氟载氧乳剂的制备

在10毫升体积比为1:0.5-1:2的盐溶液/乙醇的溶剂中，加入质量浓度分别为1%-50%的氟碳化合物、¹⁸F的1,2-二棕榈酸甘油酯¹⁸F-DP和甘露糖修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺Man-DSPE，另外，再加入质量浓度分别为0%-10%的乳化剂和/或其他助剂，在室温下采用匀浆机以一定的速率进行间歇性搅拌，冷却后离心，取上清液即可得到含氟载氧乳剂；

（3）巨噬细胞包载壳聚糖纳米粒和/或含氟载氧乳剂

将细胞密度为5000个/孔板肠道M2型巨噬细胞与所述的壳聚糖纳米粒和/或所述的含氟载氧乳剂共孵育12-72小时，得到巨噬细胞包载的壳聚糖纳米粒和含氟载氧乳剂，实现多功能肠道诊疗制剂；其中，

所述的金纳米棒的直径为40-100 nm，长径比为2-5；

所述的靶向抗体为5-羟色胺受体3抗体Anti-5-HT3R、血管内皮生长因子抗体Anti-VEGF、组胺受体H1抗体Anti-HRH1、类胰蛋白酶多克隆抗体Polyclonal Antibody toTryptase中的一种；

所述的氟碳化合物为全氟环醚、全氟萘烷、全氟甲基环已基哌啶、全氟溴辛烷、1-溴十五氟庚烷、1-溴十三氟己烷中的一种；

所述的盐溶液为生理盐水、磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、三强甲氨基甲烷缓冲液、巴比妥缓冲液、甲酸钠缓冲液、醋酸-锂盐缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液、醋酸-醋酸钾缓冲液中的一种。

2.根据权利要求1所述多功能肠道诊疗制剂的制备方法，其特征在于，所述的乳化剂为磷脂，包括大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂、氢化大豆磷脂酰胆碱、氢化蛋磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆寇酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、1-肉豆寇酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-硬脂酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-棕榈酰磷脂酰胆碱、1-棕榈酰-2-油酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰-2-亚油酰磷脂酰胆碱或二油酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、氢化二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二硬脂酰磷脂酸、儿肉豆莲酰磷脂酰乙二醇胺、二棕榈酰磷脂耽乙二醇胺、脑磷脂酰丝氨酸、二肉豆蔻县磷脂酰丝氨酸、儿棕榈酰磷脂酰丝氨酸、蛋磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、脑鞘磷脂中的至少一种；

所述的助剂为聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯Tu-80、椰油脂肪酸二乙醇酰胺6501、脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-9、月桂醇聚氧乙烯醚Brij-35或聚乙二醇辛基苯基醚Triton X-100中的一种或几种混合物。

3.根据权利要求1所述多功能肠道诊疗制剂的制备方法，其特征在于，所述的间歇性搅拌为搅拌1分钟，终止1分钟，搅拌时间为2-4小时。