[发明专利]一种中生菌素F组分母药及其制备方法

权利要求书

1.一种中生菌素F组分母药，其特征在于，中生菌素F组分的含量为60.8-78.7wt%。

2.根据权利要求1所述的中生菌素F组分母药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）配制生产试管斜面培养基，并在斜面上接入链霉菌，进行培养；当斜面培养基中长出单菌落时用接种针挑出单菌落进入下一步培养；

（2）配制菌种发酵的种子培养基，并接种步骤（1）的单菌落进行培养，得到种子培养液；

（3）配制发酵罐培养基，接入上步骤（2）得到的种子培养液，其中，种子培养液与发酵培养液体积比为10%-15%；

（4）将发酵液经过过滤、离子交换、洗脱、浓缩、脱色、降温、干燥步骤后得到中生菌素母药。

3.根据权利要求2所述的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）生产试管的斜面培养基采用玉米粉或者玉米淀粉作为碳源，用量3-7%；采用尿素作为氮源，用量1-3%；微量元素氯化钠，用量0.1-0.2%；微量元素氯化镁用量0.1-0.2%；磷源采用磷酸二氢钾，用量0.2-0.4%；琼脂用量20g/L；用2mol/L盐酸或2mol/L氢氧化钠调pH值为7.0-7.4；用自来水补足，配制时步骤如下：

第一步，在40±2℃的自来水中依次加入氯化钠、氯化镁、磷酸二氢钾、尿素，搅拌充分溶解后，再加入玉米淀粉，搅拌至均匀无团块；该步用自来水为总配制用水量的70%，配制过程在水浴中完成；

第二步，用第一步同样温度的自来水定容；

第三步，用第二步定容好的溶液放置室温，等温度降至20℃如果pH高于7.4，用2mol/L盐酸调整；如果低于7.0，用2mol/L氢氧化钠调整pH；然后加入琼脂，搅拌均匀；

第四步，以上调整好的培养基灭菌后制作斜面，并在37℃培养72小时，无杂菌落便可使用；

第五步，在斜面上接入链霉菌，培养140-150小时后，长出灰白色菌苔；

（2）菌种发酵的种子培养基中采用玉米粉或者玉米淀粉作为碳源，用量2-3%；冷榨大豆饼粉作为氮源，用量2%-3；添加速效碳源葡萄糖0.5-2%；添加速效氮源尿素1%-2%；添加无机盐氯化钠、磷酸二氢钾和氯化镁，用量分别是氯化钠0.1-0.2%，磷酸二氢钾用量0.1-0.2%，氯化镁0.2-0.4%；同时添加豆油作为消泡剂用量为0.3%-0.5%；进行消毒，种子培养基体积与发酵培养基体积百分比为10-15%，培养时通气量为300L/min；搅拌速度为120-150rmp，培养温度28±2℃，pH值自然，培养周期24-28h；

（3）菌种发酵罐的培养基采用玉米粉或者玉米淀粉作为碳源，用量2-3%；用冷榨大豆饼粉作为氮源，用量2%-3%；添加速效氮源尿素1%-2%；添加无机盐氯化钠、磷酸二氢钾和氯化镁，氯化钠的用量为0.1-0.2%，磷酸二氢钾的用量为0.1-0.2%，氯化镁的用量为0.2-0.4%；同时添加豆油作为消泡剂用量为0.1%-0.2%，进行消毒，种子培养基体积与发酵培养基体积百分比为10-15%，培养时通气量为300L/min，搅拌速度为120-150rmp，培养温度28±2℃，pH自然，发酵周期72-90h，pH为7.2开始放罐；

（4）放罐时，发酵液中中生菌素F含量为3-5g/L，发酵液生产中生菌素F母药的流程如下：

第一步，将发酵液用草酸调节pH为3.5±0.3，然后采用超滤过滤；

第二步，滤液以2BV/h的速度通过树脂进行离子交换，再用洗脱液洗脱，收集后的洗脱液调整pH值至3.5；

第三步，采用减压浓缩将洗脱液至浓度为40±5g/L；

第四步，在上一步浓缩液中加入活性炭，常温搅拌脱色30min过滤；

第五步，滤液在60℃下再减压浓缩至浓度为90±5g/L；

第六步，将浓缩液以10℃/min的降温速度降至9℃，在9℃保持10h，期间搅拌转速维持50-100转/分，大量晶体析出；

第七步，过滤并干燥，在压力-0.1Mpa，温度60℃条件下干燥至水分≤5%，得到中生菌素母药，经检测得到的是含量在60-80%的中生菌素母药。

4.根据权利要求3所述的生产方法，其特征在于，所述的链霉菌优选为陕西麦可罗生物科技有限公司生产的链霉菌（公司菌株标号ZS-Ⅱ-D190515）为生产菌株。