[发明专利]炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法

说明书

本发明公开了炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，涉及药材检验技术领域。本发明检验方法以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下洗脱步骤：步骤S1：梯度洗脱时长0‑9min，取流动相A占比19‑22％，流动相B占比81‑78％；步骤S2：梯度洗脱时长9‑18min，取流动相A占比22‑30％，流动相B占比78‑70％；步骤S3：梯度洗脱时长18‑29min，取流动相A占比30‑66％，流动相B占比70‑34％；步骤S4：梯度洗脱时长29‑33min，取流动相A占比66‑19％，流动相B占比34‑81％；步骤S5：梯度洗脱时长33‑45min，取流动相A占比19％，流动相B占比81％。本发明炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法弥补了目前没有炙甘草饮片特征图谱检验方法的空缺。

技术领域

本发明涉及药材检验技术领域，特别是涉及炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

背景技术

炙甘草为类圆形或椭圆形切片，表面红棕色或灰棕色，微有光泽，切面黄色至深黄色，形成层环明显，射线放射状，炙甘草是中国的传统中药饮片，具有补脾和胃，益气复脉的作用，临床应用广泛，用量极大；

目前炙甘草饮片检验标准为《中国药典》2020版一部，暂无特征图谱检验方法，炙甘草原药材及饮片检测时保留时间不稳定，锋面积不稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件不稳定，因此，我们提出炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

发明内容

本发明的目的在于提供炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，通过设计出保留时间稳定，锋面积稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件稳定的可施行的特征图谱的检验方法，以解决上述背景中提出的问题。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为炙甘草饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，所述检验方法以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下洗脱步骤：

步骤S1：梯度洗脱时长0-9min，取流动相A占比19-22％，流动相B占比81-78％；

步骤S2：梯度洗脱时长9-18min，取流动相A占比22-30％，流动相B占比78-70％；

步骤S3：梯度洗脱时长18-29min，取流动相A占比30-66％，流动相B占比70-34％；

步骤S4：梯度洗脱时长29-33min，取流动相A占比66-19％，流动相B占比34-81％；

步骤S5：梯度洗脱时长33-45min，取流动相A占比19％，流动相B占比81％。

优选地，所述步骤S1-步骤S5中，洗脱流速0.7ml/min，检测波长237nm，柱温：30℃，理论塔板数≥5000。

优选地，所述检验方法包括对照品溶液制备，所述对照品溶液制备方法，包括如下步骤：

步骤1，取甘草或甘草对照药材0.2g，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇100ml，密塞，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；

步骤2，另取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含甘草苷0.1mg、甘草酸0.2mg的溶液，作为对照品参照物溶液。

优选地，所述步骤1中超声处理功率250W，频率40kHz，步骤2中对照品参照物溶液包括甘草酸重量＝甘草酸铵重量/1.0207。

优选地，所述检验方法包括供试品溶液制备，包括：

步骤3，取本品，研细，取0.2g，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇100ml，密塞，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，制成供试品溶液。