[发明专利]用于检测猫杯状病毒的引物探针组合物、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种用于检测猫杯状病毒的引物探针组合物，其特征在于，包括：

正向引物，其序列为：5’-TAAGGTTGCTGCAGGTTG-3’；

反向引物，其序列为5’-ACACCATAATGACCAAGGA-3’；

探针，其序列为：5’-ACAATCCTTAGGCCCTTTGCTCAACCCA-3’。

2.如权利要求1所述的用于检测猫杯状病毒的引物探针组合物，其特征在于：所述探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。

3.如权利要求2所述的用于检测猫杯状病毒的引物探针组合物，其特征在于：所述荧光报告基团包括FAM、VIC、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、Texas RED或LC RED460中的一种；所述荧光淬灭基团包括BHQ1、BHQ2或BHQ3中的一种。

4.一种用于检测猫杯状病毒的试剂盒，其特征在于：包括PCR反应液；所述PCR反应液包括权利要求1-3任意一项所述的用于检测猫杯状病毒的引物探针组合物。

5.如权利要求4所述的用于检测猫杯状病毒的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括：1-5mM的MgCl₂、20-50mM的Tris、100-500mg/l的BSA、10-100μM的dNTPs、0.1-1μM的正向引物、0.1-1μM的反向引物、0.1-1μM的探针。

6.如权利要求4所述的用于检测猫杯状病毒的试剂盒，其特征在于：还包括酶混合液；所述酶混合液40U/μl的RNA酶抑制剂、25U/μl的逆转录酶和5U/μl的Taq酶。

7.如权利要求4所述的用于检测猫杯状病毒的试剂盒，其特征在于：还包括阳性对照和阴性对照；所述阳性对照为合成的猫杯状病毒的假病毒；所述阴性对照为超纯水。

8.一种用于检测猫杯状病毒的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测样本的DNA；

(2)以待测样本的DNA为模板，进行荧光定量PCR反应，所述PCR反应体系包括权利要求1-3任意一项所述的用于猫杯状病毒的引物探针组合物；

(3)PCR反应结束后，根据Ct值判定检测结果。

9.如权利要求8所述的用于检测解脲脲原体的方法，其特征在于，所述步骤(2)中PCR反应程序为：42℃，15min；95℃，3min，95℃，10s，58℃，20s，40个循环。