[发明专利]一种热稳定性提高的羧肽酶A突变体在审
| 申请号: | 202111594934.9 | 申请日: | 2021-12-23 |
| 公开(公告)号: | CN114277018A | 公开(公告)日: | 2022-04-05 |
| 发明(设计)人: | 梁志宏;明玥;王鸿磊;张昊祥 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | C12N9/48 | 分类号: | C12N9/48;C12N15/57;C12N15/70;C12N1/21;A23L5/20;C12R1/19 |
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| 地址: | 100083 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 热稳定性 提高 羧肽酶 突变体 | ||
1.一种热稳定性提高牛胰腺羧肽酶A突变体,其特征在于,以氨基酸序列SEQ ID No.1所示的牛胰腺羧肽酶A为亲本酶,截除第133位的苏氨酸~第139位的缬氨酸,共截除7个氨基酸。
2.编码权利要求1所述的牛胰腺羧肽酶A突变体的基因。
3.包含权利要求2所述的牛胰腺羧肽酶A突变体编码基因的载体。
4.如权利要求3所述的编码基因的载体,其特征在于,所述载体为pET-28a(+);突变体编码基因经过大肠杆菌密码子优化,所述密码子优化的羧肽酶A编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.包含权利要求2所述的突变体基因及权利要求3所述载体的工程菌。
6.如权利要求5所述的工程菌,其特征在于,所述工程菌为包括大肠杆菌E.coli DH5α和BL21(DE3)。
7.权利要求1所述的牛胰腺羧肽酶A突变体或权利要求3或5所述的工程菌诱导表达。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述诱导表达培养液的初始OD600为0.5~0.7;所述诱导表达的温度为19℃,时间为12h,转速为200rpm;所述诱导剂ITPG的浓度为0.2mM。
9.权利要求1所述的突变体,或权利要求2所述的基因,或权利要求3所述的载体,或权利要求5所述的表达工程菌在食品、饲料领域赭曲霉毒素脱毒中的应用。
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