[发明专利]一种基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法

权利要求书

1.一种基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.外植体的处理：选择多肉植物的肉质叶片为外植体，依次用75wt％的乙醇、0.1wt％的氯化汞、5wt％的次氯酸钠浸泡外植体，每次浸泡5-10min，每次浸泡完后，用无菌水洗涤，得到无菌外植体；

S2.丛生芽的培养：将无菌外植体接种到不定芽诱导培养基上培养，得到从生芽；

S3.继代、生根培养：将得到的从生芽转移到继代培养基上进行继代培养，然后转移到生根培养基上进行生根培养；

S4.壮苗培养：将生根苗分割成2-3株一丛，接种到壮苗培养基中培养，形成1.5-3cm的小苗株；

S5.炼苗移栽：将小苗株移到室温内驯化5-10d，取出苗洗净植株根系，全株浸泡2-5wt％的赤霉素10-15min，晾干水分后，移植于改性基质苗钵中，覆盖薄膜1-2wk，2wk后逐渐增加光照，3-4wk后，植株开始生长，得到完整多肉植株。

2.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述不定芽诱导培养基的配方为：MS+1-3mg/L细胞分裂素+0.05-0.07mg/L生长素+12-15g/L果糖+1-5g/L谷氨酸+0.2-0.5mg/L维生素K；所述的从生芽培养条件为：温度20-27℃，光照强度2200-2700Lx，每天光照12-14h，培养10-15天，湿度为50-60％。

3.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述继代培养基的配方为：MS+1-3mg/L乙烯+0.1-0.3mg/L赤霉素+0.3-0.7mg/L细胞分裂素+10-15g/L葡萄糖+1-3g/L谷氨酸+2-4g/L苯丙氨酸+0.5-1mg/L维生素B1+0.5-1mg/L维生素B12+0.2-0.5mg/L维生素K+5-10g/L蔗糖；所述的继代培养条件为：温度22-27℃，光照强度2500-2800Lx，每天光照13-15h，培养12-15天，湿度为50-60％。

4.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培养基的配方为：MS+1-2g/L生根粉+1-4mg/L细胞分裂素+0.5-1mg/L赤霉素+4-10mg/L谷氨酸+0.5-1mg/L维生素B12+0.2-0.5mg/L维生素K+7-15g/L果糖；所述的生根培养条件为：温度25-27℃，光照强度2600-2800Lx，每天光照10-12h，培养5-10天，湿度为50-60％。

5.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述壮苗培养基的配方为：MS+0.3-0.5mg/L细胞分裂素+0.1-0.4mg/L生长素+0.2-0.5mg/L维生素K+4-12mg/L谷氨酸+20-35g/L葡萄糖+7-10g/L琼脂；所述的壮苗培养条件为：温度25-27℃，光照强度2600-2800Lx，每天光照10-12h，培养15-20天，湿度为50-60％。

6.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，步骤S5中所述增加光照至3000-5000Lx，每天光照15-17h，相对湿度为55-65％。

7.根据权利要求1所述基于外植体的多肉植物组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述改性基质苗钵为填充了70％改性基质的培养苗钵，所述改性基质由以下原料按重量份制备而成：固定化营养物质10-20份、海藻酸钠13-17份、岩藻多糖5-12份、氯化钙2-5份、硅藻土50-70份。