[发明专利]制备重组腺相关病毒的辅助质粒及其应用

权利要求书

1.用于制备重组腺相关病毒的辅助质粒，包括：

1) AAV的 Rep和Cap蛋白编码序列；

2) 至少一个启动子序列；以及

3) 至少一个DA’序列或DA’序列的反向互补序列AD’序列，

其中，所述DA’序列为SEQ ID NO：4所示序列，所述AD’序列为SEQ ID NO：3所示序列。

2.如权利要求1所述的辅助质粒，其中至少一个DA’或AD’序列位于Rep和Cap蛋白编码序列的上游。

3.如权利要求1所述的辅助质粒，其中至少一个DA’或AD’序列位于所述Rep和Cap蛋白编码序列的下游。

4.如权利要求1所述的辅助质粒，其中，所述辅助质粒从5’至3’方向依次包括：

i) DA’或AD’序列、启动子序列以及Rep和Cap蛋白编码序列；

ii) DA’或AD’序列、启动子序列、Rep和Cap蛋白编码序列以及DA’或AD’序列；

iii) DA’或AD’序列、启动子序列、Rep和Cap蛋白编码序列、DA’或AD’序列以及启动子序列；或

iv) Rep和Cap蛋白编码序列、DA’或AD’序列以及启动子序列。

5.如权利要求1-4任一项所述的辅助质粒，其中所述启动子为P5启动子。

6. 如权利要求5所述的辅助质粒，其中所述P5启动子序列为SEQ ID NO：2所示序列。

7.如权利要求1-4任一项所述的辅助质粒，其中所述Rep和Cap蛋白来自2型腺相关病毒。

8.提高重组腺相关病毒生产能力的方法，包括使用权利要求1-7任一项所述的辅助质粒转化宿主细胞。