[发明专利]一种西瓜小对叶组培一步成苗培养基及一步成苗方法

权利要求书

1.一种西瓜小对叶组培一步成苗方法，其特征在于，将西瓜小对叶外植体接种西瓜小对叶组培一步成苗培养基上进行增殖培养，西瓜小对叶外植体通过以下方法得到：选用0.5-1cm的茎段，用洗洁精水浸泡10-15min，流水下冲洗，然后在超净工作台上用75%酒精消毒15s，再用0.1%HgCl₂表面灭菌2.5min，无菌水冲洗4-5次，即得；

西瓜小对叶组培一步成苗培养基由如下组分组成：基本培养基、6-苄氨基嘌呤、1-萘乙酸、小球藻生长因子；

基本培养基为1/2MS培养基；

6-苄氨基嘌呤在培养基中的浓度为0.2mg/L，1-萘乙酸在培养基中的浓度为0.1mg/L，小球藻生长因子在培养基中的体积浓度为1%-5%；

小球藻生长因子的制备方法如下：

（1）按1：10比例接种蛋白核小球藻至锥形瓶中，所用的培养基为BG11培养基，28℃光照连续培养，每天在显微镜下血球板计数，直至密度≥10⁷ CFU/ml；

（2）取生长状态良好的藻液20ml在4000r/min离心10min，收集藻泥沉淀，弃去上清，用无菌水离心洗涤沉淀；

（3）沉淀用无菌水100ml稀释置于高压锅中，120℃加热萃取20min，取出后在室温下自然冷却，过滤沉淀留上清液，得到含小球藻生长因子的提取液。

2.如权利要求1所述的西瓜小对叶组培一步成苗方法，其特征在于，步骤（2）藻液中血球板计数为3.5×10⁷个/ml。

3.如权利要求1所述的西瓜小对叶组培一步成苗方法，其特征在于，增殖培养方法如下：培养温度为25±1℃，每天光照时间12 h，光照强度1500lx-2000lx。