[发明专利]一种猪肺炎支原体的灭活方法在审
| 申请号： | 202111535607.6 | 申请日： | 2021-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN114134098A | 公开（公告）日： | 2022-03-04 |
| 发明（设计）人： | 林艳;刘汉平;岳丰雄;陈莉群;夏嘉鑫;郑琴勤;项聪英 | 申请（专利权）人： | 成都史纪生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12N1/20;C12N1/02;C12N1/06;C12N13/00;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/35 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 张娟;全学荣 |
| 地址： | 610000 四川省*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 肺炎 支原体 方法 | ||
1.一种猪肺炎支原体的灭活方法，其特征在于，它包括如下步骤：
1)取猪肺炎支原体菌液，浓缩纯化；
2)取步骤1)浓缩纯化后的菌液，超声破碎，加稀释剂稀释，再加二乙烯亚胺(BEI)灭活24～48h，最后加硫代硫酸钠终止灭活。
2.根据权利要求1所述的灭活方法，其特征在于：步骤1)所述浓缩纯化是用100～500kDa中空纤维浓缩，离心，沉淀用TN buffer洗涤2～5次，再-80℃冻融1次。
3.根据权利要求2所述的灭活方法，其特征在于：所述浓缩纯化是用300kDa中空纤维浓缩，离心，沉淀用TN buffer洗涤3次，再-80℃冻融1次。
4.根据权利要求1所述的灭活方法，其特征在于：步骤2)所述稀释剂为TN buffer；所述稀释至原体积的1/10～1/100。
5.根据权利要求1所述的灭活方法，其特征在于：步骤2)所述超声破碎的功率200W～500W，频率为每超声2～3秒间隔3～4秒，次数为3～5次，每次8分钟。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)所述二乙烯亚胺(BEI)的终浓度为1～5mmol/L，优选3mmol/L。
7.根据权利要求1所述的灭活方法，其特征在于：步骤2)所述灭活温度37℃，时间24～48h。
8.根据权利要求1或8所述的灭活方法，其特征在于：所述硫代硫酸钠的终浓度为1～5mmol/L，优选3mmol/L。
9.根据权利要求8所述的灭活方法，其特征在于：所述终止灭活后降温至2～8℃。
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