[发明专利]一种HSP/SAA重组蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种HSP/SAA重组蛋白，其特征在于，所述HSP/SAA重组蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.5所示，其编码基因HSP+SAA/28a基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。

2.根据权利要求1所述的HSP/SAA重组蛋白，其特征在于，所述HSP基因为HSP65基因，来源于结核分枝杆菌，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，其编码的HSP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.根据权利要求1所述的HSP/SAA重组蛋白，其特征在于，利用所述SAA基因与pET-28a载体合成SAA/pET-28a基因后进行同尾酶连接；所述SAA/pET-28a基因的核苷酸序列如SEQID No.3所示。

4.权利要求1-3任一项所述的HSP/SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)从结核分枝杆菌中提取HSP65基因，扩增、回收后进行酶切；

(2)利用SAA基因与pET-28a载体合成SAA/pET-28a基因后进行酶切；

(3)将步骤(1)和步骤(2)中的酶切产物通过BglII/BamHI同尾酶连接至载体pET-28a，再转化感受态细胞，培养后，挑选单菌落进行阳性克隆鉴定；

(4)鉴定为阳性的克隆再次转化感受态细胞，挑选单菌落加入培养基中培养，电泳鉴定有明显表达带，则得到HSP/SAA重组蛋白。

5.根据权利要求4所述的HSP/SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中扩增的引物为：

F：5'-aaggaaaaaagcggccgcgccaagacaattgcgtacg-3'；

R：5'-tccagatctgaaatccatgccacccatgtc-3'。

6.根据权利要求4所述的HSP/SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中连接体系为HSP65基因2μl；SAA基因4μl；pET-28a载体2μl；Solution I 8μl。

7.根据权利要求4所述的HSP/SAA重组蛋白的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中明显表达带的分子量为70kD。

8.权利要求1-3任一项所述的HSP/SAA重组蛋白在用于制备SAA诊断试剂中的应用。

9.权利要求1-3任一项所述的HSP/SAA重组蛋白在用于制备诊断病毒或细菌感染的制剂中的应用。