[发明专利]一种白屈菜红碱mPEG-PLGA纳米凝胶复合制剂及其制备、检测方法与应用

权利要求书

1.一种白屈菜红碱mPEG-PLGA纳米凝胶复合制剂，其特征在于，所述纳米凝胶复合制剂的处方为：18～24％泊洛沙姆407，4～8％泊洛沙姆188，5mL白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs。

2.根据权利要求1所述的纳米凝胶复合制剂，其特征在于，所述纳米凝胶复合制剂的处方为：18％泊洛沙姆407，4％泊洛沙姆188，5mL白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs。

3.根据权利要求1或2所述的纳米凝胶复合制剂，其特征在于，所述白屈菜红碱纳米粒是通过CHE-NPs的Box-Behnken响应面设计CHE-NPs处方，具体处方为：白屈菜红碱1～2mg，mPEG-PLGA质量浓度10～20mg/mL，1～2％泊洛沙姆188水溶液5mL～15mL。

4.根据权利要求3所述的纳米凝胶复合制剂，其特征在于，白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs是通过Box-Behnken响应面设计CHE-NPs处方，具体处方为：白屈菜红碱2mg，mPEG-PLGA质量浓度13mg/mL，1.8％泊洛沙姆188水溶液5mL。

5.根据权利要求1～2任一项所述的纳米凝胶复合制剂，其特征在于，所述纳米凝胶复合制剂的制备方法为：

1)采用纳米沉淀法制备纳米粒：精密称取白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs Box-Behnken响应面设计CHE-NPs处方量的白屈菜红碱和mPEG-PLGA分散于1mL丙酮中，以功率500w，频率53kHz超声5～10min，为有机相，以处方量的泊洛沙姆188为水相，调节磁力搅拌速度为800～1200r/min，以1mL/min的速度将有机相滴加到水相中，室温搅拌5～15min，得到淡蓝色乳光的混悬液；旋转蒸发仪除去有机溶剂，既得白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs；

2)温敏纳米凝胶的制备：精密称取纳米凝胶复合制剂处方量的泊洛沙姆407与泊洛沙姆188，加入处方量的白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs，置于2～6℃冰箱冷藏溶胀20～30h，至澄清透明溶液，即得白屈菜红碱纳米凝胶CHE-NPs-gel。

6.根据权利要求5所述的纳米凝胶复合制剂，其特征在于，所述纳米凝胶复合制剂的制备方法为：

1)采用纳米沉淀法制备纳米粒精密称取白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs CHE-NPs Box-Behnken响应面设计CHE-NPs处方量的白屈菜红碱和mPEG-PLGA分散于1mL丙酮中，以功率500w，频率53kHz超声5min，为有机相，以处方量的泊洛沙姆188为水相，调节磁力搅拌速度为1000r/min，以1mL/min的速度将有机相滴加到水相中，室温搅拌10min，得到淡蓝色乳光的混悬液；旋转蒸发仪除去有机溶剂，既得白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs；

2)温敏纳米凝胶的制备精密称取纳米凝胶复合制剂处方量的泊洛沙姆407与泊洛沙姆188，加入处方量的白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs，置于4℃冰箱冷藏溶胀24h，至澄清透明溶液，即得白屈菜红碱纳米凝胶CHE-NPs-gel。

7.一种用于检测白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs中的白屈菜红碱含量的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

1)对照品溶液配制精密称定白屈菜红碱对照品5mg，置于25mL量瓶中，加入甲醇超声10min，使其溶解，再加入甲醇稀释、定容，摇匀，制成质量浓度为200μg/mL的对照品溶液；

2)供试品溶液配制精密量取白屈菜红碱纳米粒CHE-NPs 0.1mL，置2mL量瓶中，加甲醇1.9mL，超声30min破乳，在35℃条件下以氮气流吹干，残渣加入甲醇2mL复溶，用0.22μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液；

3)色谱条件 色谱柱为Ultimate XB-C18，规格为250×4.6mm，5μm；流动相为乙腈-0.1％磷酸水，梯度洗脱，洗脱条件为0～20min，20％→60％乙腈；20～25min，60％→95％乙腈；25～35min，95％→20％乙腈；检测波长为270nm，柱温为35℃；流速为0.8mL/min；过0.22μm有机系滤膜，进样量10μL。