[发明专利]一种酶催化手性还原合成盐酸洛贝林中间体的方法

说明书

本发明公开了一种酶催化手性还原合成盐酸洛贝林中间体的方法，在反应瓶中加入有机溶剂、纯化水、缓冲盐和底物I，化合物II，控制在合适的温度，调节PH至合适范围后，加入酶，保温反应12小时即得到相应的中间体III，中间体III经水解得到产物IV。本发明收率和纯度均优于手性化学试剂制备工艺。本发明通过采用绿色环保的酶法工艺进行底物I的还原，避免了手性化学试剂制备工艺选择性低，使用危险，费用较高以及环保处理困难等问题。

技术领域

本发明涉及一种酶催化手性还原合成药物中间体的方法，具体涉及一种酶催化手性还原合成盐酸洛贝林中间体的方法。

背景技术

盐酸洛贝林，英文名称为Lobeline hydrochloride，化学名称为2-[6-(2-羟基-2-苯乙基)-1-甲基-2-哌啶基]-1-苯乙酮盐酸盐，结构式如下所示。

盐酸洛贝林为反射性呼吸中枢兴奋药。由于刺激颈动脉体及主动脉弓化学感受器，反射性地兴奋延髓呼吸中枢，对迷走神经中枢和血管运动中枢也同时有反射性的兴奋作用；对植物神经节先兴奋而后阻断。用于各种原因引起的呼吸抑制。常用于新生儿窒息，一氧化碳、阿片中毒等。

洛贝林的合成方法有很多，总体来看分为两类：一类是逐步合成手性中心，这一类方法一般都存在路线长、收率低的缺点，很难应用于工业化生产。其中典型路线如下(J.Org.Chem:67(2002)9192-9199)。

另一类是先合成对称的中间体山梗烷酮(即底物I)，然后采用不对称合成的方法获得最终产物。

山梗烷酮(即底物I)的合成方法简单，原料也易得。反应式如下：

后续不对称合成方法也有不少，英国的Vladimir等人采用(S)-BTM非酶的不对称酰化、然后氧化、脱酰基进行不对称合成洛贝林。(Organic Letter:9(2007)3237 3240)。

Franz-Dietrich等人运用金属铑络合物催化加氢反应，同时应用大分子的磷配体，可一步合成目标产物，但该步骤需要1520bar的高压条件，且收率低，很难用于工业化生产(US20060014791)。

发明内容

本发明的目的是克服现有盐酸洛贝林合成工艺路线长、收率低、手性试剂选择性低、价格昂贵等问题，提供一种酶催化手性还原合成盐酸洛贝林中间体的方法，该方法用酶来进行还原，条件温和，方法简单，极大的降低了成本。

本发明的技术方案如下：

一种酶催化手性还原合成盐酸洛贝林中间体的方法，包括以下步骤：

1)、在反应瓶中加入有机溶剂和底物I，化合物II，控制反应温度在-30℃～20℃，向反应瓶中加入预处理好的固定化酶，反应开始，保温至反应结束；

2)、反应完成后，过滤，滤液降温至0℃，在向反应瓶中加5％盐酸调节PH至1～2，搅拌0.5小时后升温至室温，搅拌至水解反应结束；

3)、反应完成后，分出有水层，氢氧化钠溶液调节pH至12～13，室温搅拌1小时，加有机溶剂萃取，有机相浓缩后加异丙醇搅拌，析出晶体，过滤，烘干得产物IV。

步骤1)中固定化酶为海藻酸钙固定化面包酵母。

步骤1)中所述反应温度在-20℃至10℃，优选控制反应温度在-20℃～0℃，进一步优选地控制反应温度在-10～-5℃。

步骤1)中酶与底物的质量比在10:1至1:1之间。