[发明专利]一种提高苹果多倍体诱变育种中的丛生芽生根率的方法

说明书

本发明公开了一种苹果多倍体的高效诱变育种方法，涉及农业种植技术领域；包括以下步骤：包括以下步骤：将苹果外植体在含有秋水仙素、碳纳米材料和啤酒酵母细胞壁的培养基中进行加倍培养，再在含有碳纳米材料和啤酒酵母细胞壁的培养基中进行组织培养和继代培养。本发明的杂交育种方法能够提高苹果三倍体的育种过程中的丛生芽生根率，进而提高优质种质资源的利用率。

技术领域

本发明涉及农业种植技术领域，特别是涉及一种提高苹果多倍体诱变育种中的丛生芽生根率的方法。

背景技术

苹果是世界性果树,其生态适应性较强,果品营养价值高,耐贮性好,供应周期长。目前栽培苹果品种以二倍体为主,也有少许多倍体。多倍体果树一般具有生长健壮、枝粗、叶厚、果大、少子或无子、产量高、适应性强等优点,因此,多倍体育种一直是果树育种的一条重要途径，生产上应用的苹果多倍体多为三倍体。在三倍体的育种过程中，容易出现丛生芽不生根的现象，极易造成优质种质资源的丢失，多倍体的育成率较低。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高苹果多倍体诱变育种中的丛生芽生根率的方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明的诱变育种方法能够提高苹果多倍体的育种过程中的丛生芽生根率，进而提高优质种质资源的利用率。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种苹果多倍体的高效诱变育种方法，包括以下步骤：将苹果外植体在含有秋水仙素、碳纳米材料和啤酒酵母细胞壁的培养基中进行加倍培养，再在含有碳纳米材料和啤酒酵母细胞壁的培养基中进行组织培养和继代培养。

进一步地，所述碳纳米材料包括碳纳米管和石墨烯。

进一步地，所述加倍培养为将所述苹果外植体放入培养基1中培养2天，再在培养基2中培养2天；

所述培养基1的成分为：MS+20～40mg/L秋水仙素+0.2～0.4g/L碳纳米材料+0.1～0.5g/L啤酒酵母细胞壁；

所述培养基2成分为：MS+40～80mg/L秋水仙素+0.2～0.4g/L碳纳米材料+0.1～0.5g/L啤酒酵母细胞壁。

进一步地，所述培养基1的成分为：MS+30mg/L秋水仙素+0.3g/L碳纳米材料+0.2g/L啤酒酵母细胞壁；所述培养基2的成分为：MS+50mg/L秋水仙素+0.3g/L碳纳米材料+0.2g/L啤酒酵母细胞壁。

进一步地，所述组织培养和继代培养的培养基为：MS+0.2～0.5mg/L IAA+0.2～0.4g/L碳纳米材料+0.1～0.5g/L啤酒酵母细胞壁。

进一步地，所述苹果外植体为来自果树新稍的顶芽。

酵母细胞壁含有丰富的β-葡聚糖，β-葡聚糖活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖，它们大多数是通过β-1,3键结合，我们在研究中发现，在多倍体组织培养中，将酵母细胞壁加入培养液中能够刺激细胞分裂素的产生，进而提高多倍体丛生芽的生根率。碳纳米材料能够调节植物生长发育，在秋水仙素多倍体培养基中添加碳纳米材料，能够促进多倍体丛生芽生根。

本发明公开了以下技术效果：

本发明在多倍体组织培养中的培养基中添加碳纳米管和啤酒酵母细胞壁，能够有效提高丛生芽生根，进而有利于提高多倍体的育成数量；将外植体先在低浓度秋水仙素培养基培养，再在高浓度水仙素培养基培养能够进一步提高丛生芽生根率。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。