[发明专利]一种小米蛋白和小米蛋白水解物的制备方法及小米蛋白水解物的应用

权利要求书

1.一种小米蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)使用超微粉碎机研磨小米，将所得小米粉过60目筛，称取100 g小米粉与正己烷按料液比1:8-1:12(w/v)混合，超声萃取20 min-2 h，500-8000g离心，弃上清，并对剩下的残渣重复上述操作一次，将收集的残渣放置于通风橱中自然风干，得到脱脂小米粉；

(2)称取(1)所述方法得到的脱脂小米粉与超纯水按料液比1:4-1:8(w/v)混合并充分搅拌，用1mol/LNaOH调至pH＝7.0，加入30 U/g的α-淀粉酶，50℃水浴酶解0.5-4 h，期间持续搅拌使体系均匀，反应结束后沸水浴20 min灭酶，自然冷却至室温，500-8000g离心去除上清，用纯净水冲洗并重复离心2-4次，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到小米蛋白A。

2.根据权利要求1所述一种小米蛋白的制备方法，其特征在于，步骤(1)使用超微粉碎机研磨小米，将所得小米粉过60目筛，称取100 g小米粉与正己烷按料液比1:10(w/v)混合，超声萃取1 h，2000g离心，弃上清，并对剩下的残渣重复上述操作一次，将收集的残渣放置于通风橱中自然风干，得到脱脂小米粉。

3.根据权利要求1所述一种小米蛋白的制备方法，其特征在于，称取步骤(1)所述方法得到的脱脂小米粉与超纯水按料液比1:6(w/v)混合并充分搅拌，用1mol/LNaOH调至pH＝7.0，加入30 U/g的α-淀粉酶，50℃水浴酶解2h，期间持续搅拌使体系均匀，反应结束后沸水浴20 min灭酶，自然冷却至室温，2000g离心去除上清，用纯净水冲洗并重复离心2-4次，将收集的固体沉淀冷冻干燥，得到得到小米蛋白A。

4.一种小米蛋白水解物的制备方法，其特征在于，使用权利要求1的小米蛋白水解制备，包括如下步骤：

(1)称取先前制备的提取物A与超纯水按料液比1:50(w/v)混合，用1mol/LHCL调至pH＝2.0；

(2)按酶/底物＝1:25-1:100加入活力500U/mg的胃蛋白酶；

(3)37℃水浴酶解0.5-4 h；

(4)沸水浴20 min灭酶活，自然冷却至室温；

(5)用1mol/LNaOH调至pH＝7.5，按酶/底物＝1:5-1:20加入1000 U/mg的胰蛋白酶，37℃水浴酶解0.5-4h；

(7)沸水浴20 min使酶失活，自然冷却至室温；

(8)水解样品8000g离心20 min，收集上清液；

(9)冷冻干燥，获得小米蛋白水解物D，即小米蛋白水解物粉末。

5.根据权利要求4所述一种小米蛋白水解物的制备方法，其特征在于，步骤(2)按酶/底物＝1:70加入活力500U/mg的胃蛋白酶，37℃水浴酶解2 h。

6.根据权利要求4所述一种小米蛋白水解物的制备方法，其特征在于，步骤(5)用1mol/L NaOH调至pH＝7.5，按酶/底物＝1:10加入1000 U/mg的胰蛋白酶，37℃水浴酶解2h。

7.根据权利要求4所述一种小米蛋白水解物的制备方法，其特征在于，所得小米蛋白水解物D水解度为15.6％-31.4％。

8.权利要求7所述方法制备的小米蛋白水解物D用于制备治疗或改善结肠炎症的药物。