[发明专利]连花清瘟胶囊中有效成分的含量测定方法

权利要求书

1.连花清瘟胶囊中有效成分的含量测定方法，使用超高效液相色谱仪进行测定，其特征在于，采用一测多评法，以绿原酸为内标物，建立新绿原酸、隐绿原酸、异连翘酯苷A、槲皮苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、甘草酸相对绿原酸的相对校正因子，然后选择绿原酸对照品为标准进行测定，得到连花清瘟胶囊中绿原酸的含量，再根据相对校正因子计算得到新绿原酸、隐绿原酸、异连翘酯苷A、槲皮苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、甘草酸的含量。

2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，绿原酸对新绿原酸、隐绿原酸、异连翘酯苷A、槲皮苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、甘草酸的相对校正因子依次为1.0258-1.0327，1.4620-1.4803，2.6202-2.6388，0.9893-1.0348，1.5265-1.5838，7.5678-7.7449。

3.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，绿原酸对新绿原酸、隐绿原酸、异连翘酯苷A、槲皮苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、甘草酸的相对校正因子依次为1.0301、1.4743、2.6309、1.0184、1.5501、7.6567。

4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，所述相对校正因子的建立包括：

a. 混合对照品的制备：分别精密称取新绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、绿原酸对照品、异连翘酯苷A对照品、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸对照品、槲皮苷对照品、甘草酸铵对照品，加甲醇配制成不同质量浓度的系列混合对照品溶液；

b. 色谱条件：采用ACQUITY UPLC® HSS T3色谱柱，以甲醇-乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱；

c. 测定：精密吸取混合对照品溶液，注入超高效液相色谱仪，得到混合对照品的含量谱图；

d. 计算：以绿原酸为内标物，根据公式f_si=f_s/f_i=(As/Cs)/(Ai/Ci)，计算得到新绿原酸、隐绿原酸、异连翘酯苷A、槲皮苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、甘草酸相对绿原酸的相对校正因子，式中f_si为内标物s相对待测成分i的校正因子，ƒ_i为待测物i的绝对校正因子，ƒ_s为内标物s的绝对校正因子，W_i为内标物质的质量浓度，A_i为内标物质的峰面积，W_s为待测物的质量浓度，A_s为待测物的峰面积。