[发明专利]基于多重荧光定量ARMS-PCR技术的新冠病毒奥密克戎突变序列检测技术及其应用

权利要求书

1.一种用于检测新冠病毒核酸S基因突变类型的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下任一种或几种引物和探针，其中每组中的引物都包含正向引物和反向引物，每个所述探针的两端分别标记有荧光报告基团/荧光淬灭基团：

a.用于检测S基因突变类型：序列位置23599，序列变化TG的引物和探针；其中正向引物的核苷酸序列如：SEQ ID No.1所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，其中探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；

b.用于检测S基因突变类型：序列位置23048，序列变化GA的引物和探针；其中正向引物的核苷酸序列如：SEQ ID No.4所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，其中探针的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示；

c.用于检测S基因突变类型：序列位置23202，序列变化CA的引物和探针；其中正向引物的核苷酸序列如：SEQ ID No.7所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示，其中探针的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示；

d.用于检测S基因突变类型：序列位置22898，序列变化GA的引物和探针；其中正向引物的核苷酸序列如：SEQ ID No.10所示，反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，其中探针的核苷酸序列如SEQ ID No.12所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光报告基团/荧光淬灭基团选自选自FAM、VIC或HEX、ROX、NED、CY3或CY5荧光报告基团/MGB或非MGB的BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1、Tamra和Quencher荧光淬灭基团且试剂盒中各个所述探针上荧光报告基团互不相同。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括以下组分中的任一种或几种：PCR反应液、酶混合液、阳性对照、阴性对照。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括缓冲液、MgCl₂、dUTP和dNTPs；所述酶混合液包括Taq酶、反转录酶和UNG酶。

5.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为含有新冠病毒突变序列的假病毒。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为含有部分新冠病毒的基因序列的假病毒。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括用于检测内标的探针。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述探针包括核苷酸序列如SEQ IDNo.13、SEQ ID No.14、SEQ ID No.15所示的多核苷酸中的任一种或几种。

9.如权利要求1-8任一项所述试剂盒用于检测以下任一种或几种新冠病毒核酸S基因突变类型中的用途：a,S基因突变类型：序列位置23599，序列变化TG；b.S基因突变类型：序列位置23048，序列变化GA；c.S基因突变类型：列位置23202，序列变化CA；d.S基因突变类型：序列位置22898，序列变化GA。

10.如权利要求1-8任一项所述试剂盒在制备检测以下任一种或几种新冠病毒核酸S基因突变类型的产品中的用途：a.S基因突变类型：序列位置23599，序列变化TG；b.S基因突变类型：序列位置23048，序列变化GA；c.S基因突变类型：序列位置23202，序列变化CA；d.S基因突变类型：序列位置22898，序列变化GA。