[发明专利]用于检测伏马毒素的胶体金试纸条、试剂盒及检测方法

说明书

本发明涉及检测制剂领域，具体讲，涉及一种用于检测伏马毒素的胶体金试纸条，试剂盒及检测方法。胶体金检测制剂包括胶体金试纸条和酶联反应孔，胶体金试纸条包括样品垫、NC膜、吸收垫，NC膜上设置有T线和C线；酶联反应孔中冻干保存有伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金；T线处包被有伏马毒素完全抗原，用于竞争结合所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金；T线由T线抗原划线液制备而成；C线处包被有羊抗小鼠抗体，用于捕获未结合的所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金。本发明的伏马毒素胶体金试纸条，通过手持式读卡器在15min实现对伏马毒素Fb1的定量检测，具有线性范围宽、检测限低、灵敏度高的技术优势。

技术领域

本发明涉及检测制剂领域，具体讲，涉及一种用于检测伏马毒素的胶体金试纸条，试剂盒及检测方法。

背景技术

伏马毒素是一种串珠镰刀菌真菌分泌的毒性很强的次生代谢物，主要污染玉米，是玉米中及其制品中最常见的霉菌毒素，目前发现的伏马毒素有11种，其中FB1污染范围最大，毒性最强，因此对于其的检测具有较为重要的意义。伏马毒素可导致马的白脑软化症和猪肺水肿，具有致癌性、肝毒性、肾毒性以及胚胎毒性。

检测伏马毒素的方法主要基于色谱法(高效液相色谱、高效液相色谱-串联质谱法、气相色谱-串联质谱法)和免疫学方法。基于色谱学的方法具有灵敏度高等优点，但是所需仪器昂贵、需要专业人员，不能够满足现场的快速检测需要。免疫层析技术是以试纸条为载体，利用抗原抗体特异性结合进行可视化检测的方法。通常针对小分子污染物的检测采用免疫竞争的原理，将含有分析物的提取液与胶体金标记的抗体进行孵育，之后添加到样品垫上，液体在毛细管作用下先后经过检测限(T线)和质控线(C线)，根据目标物浓度的不同在T线呈现不同的颜色。从而达到对目标物定性或定量检测的目的。由于免疫层析方法具有简单、快速、特异性强、灵敏度高等优点，被广泛用于食品中有毒有害小分子污染物的快速检测中。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提供一种检测伏马毒素的胶体金试纸条。

本发明的第二发明目的在于提供检测伏马毒素的试剂盒。

本发明的第三发明目的在于提供检测伏马毒素的检测方法。

为了完成本发明的发明目的，采用的技术方案为：

本发明提出一种用于检测伏马毒素的胶体金检测制剂，所述胶体金检测制剂包括胶体金试纸条和酶联反应孔，所述胶体金试纸条包括样品垫、NC膜、吸收垫，所述NC膜上设置有T线和C线；其特征在于：

所述酶联反应孔中冻干保存有伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金；伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金中伏马毒素单克隆抗体的标记量为9～15μg/mL、优选为12μg/mL；

所述T线处包被有伏马毒素完全抗原，用于竞争结合所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金；所述T线由T线抗原划线液制备而成，所述T线抗原划线液中伏马毒素完全抗原的浓度为1.2～1.8mg/mL；

所述C线处包被有羊抗小鼠抗体，用于捕获未结合的所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金。

可选的，所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金的制备方法：

S1、制备胶体金溶液；

S2、取OD值为1的胶体金溶液1mL，调整pH至8.5，加入9～15μg、优选为12μg/mL的伏马毒素单克隆抗体，混匀，封闭，离心，加入洗金缓冲液，复溶沉淀，离心，最后加入重悬上样液重悬；得到所述伏马毒素单克隆抗体标记的胶体金。

可选的，所述洗金缓冲液中含有质量百分比浓度为0.2～1％的BSA、质量百分比浓度为1～10％的蔗糖、质量百分比浓度为0.5～2％的吐温-20、10mM的Tris缓冲液；pH为9.0；