[发明专利]基于RT-RAA荧光方法检测乙型脑炎病毒的试剂和试剂盒有效
申请号: | 202111462069.2 | 申请日: | 2021-12-02 |
公开(公告)号: | CN114045362B | 公开(公告)日: | 2023-05-09 |
发明(设计)人: | 徐志文;周远成;朱玲;聂民财;鲁令华;邝山 | 申请(专利权)人: | 四川农业大学;畜科生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 611130 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 rt raa 荧光 方法 检测 脑炎 病毒 试剂 试剂盒 | ||
1.检测乙型脑炎病毒的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括检测乙型脑炎病毒的组合物;所述乙型脑炎病毒为乙型脑炎病毒JEV-SC-1毒株;所述组合物包括引物JEV-RAA-F2、JEV-RAA-R1和探针;所述引物JEV-RAA-F2的核苷酸序列如序列表中序列2所示;所述JEV-RAA-R1的核苷酸序列如序列表中序列3所示;所述探针的核苷酸序列如序列表中序列4所示;所述序列4的5’端起第31位核苷酸T上标记荧光基团6-羧基荧光素,所述序列4的距5’端33位核苷酸T标记荧光淬灭基团BHQ1,所述序列4的第31位核苷酸T和32位核苷酸G中间用四氢呋喃dSpacer修饰,所述序列4的3’末端核苷酸用C3-spacer修饰;所述序列4中的Y为C或T。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述组合物还含有RT荧光基础反应单元;所述RT荧光基础反应单元包含单链DNA结合蛋白、重组酶、逆转录酶和/或DNA聚合酶。
3.根据权利要求1或2所述的试剂盒,其特征在于:所述组合物还含有镁离子缓冲液。
4.检测乙型脑炎病毒的系统,其特征在于:所述系统含有权利要求1-3中任一权利要求所述的试剂盒和荧光检测仪器。
5.权利要求1-3中任一权利要求所述试剂盒中的所述检测乙型脑炎病毒的组合物。
6.根据权利要求5所述的组合物,其特征在于:所述组合物的各组分为液体和/或固体粉末。
7.权利要求1-3中任一权利要求所述的试剂盒和/或权利要求5或6所述的组合物在非疾病诊断和/或治疗的目的的乙型脑炎病毒检测或辅助检测中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:所述检测或辅助检测的RT-RAA反应条件为39℃恒温反应30min。
9.权利要求4所述系统在制备乙型脑炎病毒检测或辅助检测产品中的应用。
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