[发明专利]肠球菌嗜铅蛋白组学分析及其应用

说明书

本发明涉及肠球菌嗜铅蛋白组学分析计其应用技术。屎肠球菌JT₁是一种抗铅耐性菌，具有产酸不产气、耐高温、耐酸、耐盐和耐胆盐等优良的性能，可以在体内顺利到达肠道，对清除人体内积累的重金属铅、治疗铅中毒有重要的现实意义，可用该菌开发新型功能性制品。采用二维电泳‑质谱联用这一差异蛋白质组学技术解析耐铅屎肠球菌JT₁菌株与非耐铅屎肠球菌M菌株的蛋白差异，制备细胞质全蛋白图谱，获得了耐铅关键蛋白，继而对该关键差异蛋白进行生物信息学分析，并且为该菌的进一步运用于动物体内的排铅作用提供可靠的理论依据。

技术领域

本发明涉及嗜铅乳酸菌菌的蛋白组学差异解析及其应用技术。采用二维电泳-质谱联用这一差异蛋白质组学技术解析耐铅屎肠球菌JT₁菌株与非耐铅屎肠球菌M菌株的蛋白差异，获得了耐铅关键蛋白，继而对该关键差异蛋白进行生物信息学分析，并且为该菌的进一步运用于动物体内的排铅作用提供可靠的理论依据。

背景技术

分离并鉴定菌株M；通过菌株吸附铅试验，比较JT₁和M菌株的耐铅特性、铅吸附影响因素以及相关生长特性；对肠球菌耐铅菌株进行双向凝胶电泳，第一向为等点聚焦（IEF），第二向为十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）,制备细胞质全蛋白图谱，根据嗜铅功能差异得到所有的差异蛋白，应用基质辅助的激光解吸串联飞行时间质谱仪（MALDI-TOF/TOF-MS）对图谱上筛选的差异蛋白点进行质谱鉴定，得到19种相关蛋白。利用Mascot检索软件查看该蛋白点，应用NCBI BLAST/Uniprot等数据库对19种差异蛋白进行蛋白生物信息学分析，探究嗜铅蛋白的功能性信息。

发明内容

屎肠球菌JT₁是从肉鸡的肠道中分离筛选得到的一种抗铅耐性菌，具有产酸不产气、耐高温、耐酸、耐盐和耐胆盐等优良的性能，可以在体内顺利到达肠道，对清除人体内积累的重金属铅、治疗铅中毒有重要的现实意义。可用该菌开发新型功能性制品。