[发明专利]一种小分子药物血药浓度的检测方法

权利要求书

1.一种小分子药物血药浓度的检测方法，其特征在于，包括：

(1)制备光纤探针：将生物素化的特异性小分子药物单克隆抗体固定至链霉亲和素光纤的表面，得到光纤探针；

(2)分别获得参照样本和待测样本：

将不同浓度的小分子药物标准品添加到血液对照品中，得到若干个具有不同小分子药物浓度的参照样本；

获取小分子药物血药浓度待测者的血液样本，得到待测样本；

(3)参照样本的竞争性结合和信号放大：

将所述若干个具有不同小分子药物浓度的参照样本分别与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物等体积混合，得到若干个参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，对所述若干个参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液进行如下竞争性结合和信号放大步骤：

竞争性结合：使所述光纤探针接触所述参照样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，参照样本中的小分子药物和小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物竞争性地与所述光纤探针上的特异性小分子药物单克隆抗体结合；

信号放大：然后使所述光纤探针接触辣根过氧化物酶生物显色剂，结合于所述光纤探针上的辣根过氧化物酶与所述辣根过氧化物酶生物显色剂高亲和力结合，产生金属沉淀，带来光纤表面的光谱红移，得到参照样本的光谱位移；

(4)获得“小分子药物浓度-相对抑制性(％)”标准曲线：

以参照样本中小分子药物的浓度为X轴，以相对抑制性为Y轴，绘制“浓度-相对抑制性(％)”非线性标准曲线；其中，不同小分子药物浓度的参照样本的相对抑制性的计算以零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移为参照，公式如下：

某小分子药物浓度的参照样本的相对抑制性(％)＝

{1–(某小分子药物浓度的参照样本的光谱位移/零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移)}×100％；

(5)待测样本的竞争性结合和信号放大：

将所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物等体积混合，得到待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，对所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液进行如下竞争性结合和信号放大步骤：

竞争性结合：使所述光纤探针接触所述待测样本与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物的混合液，待测样本中的小分子药物与小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物竞争性地与所述光纤探针上的特异性小分子药物单克隆抗体结合；

信号放大：然后使所述光纤探针接触辣根过氧化物酶生物显色剂，结合于所述光纤探针上的辣根过氧化物酶与所述辣根过氧化物酶生物显色剂高亲和力结合，产生金属沉淀，带来光纤表面的光谱红移，得到待测样本的光谱位移；

(6)获得待测样本的小分子药物浓度：

计算待测样本的相对抑制性(％)：

待测样本的相对抑制性(％)＝

{1–(待测样本的光谱位移/零小分子药物浓度的参照样本的光谱位移)}×100％；

根据所述待测样本的相对抑制性(％)，基于所述“小分子药物浓度-相对抑制性(％)”非线性标准曲线得出待测样本中的小分子药物浓度。

2.根据权利要求1所述的小分子药物血药浓度的检测方法，其特征在于，所述辣根过氧化物酶生物显色剂为3,3-二氨基联苯胺四盐酸。

3.根据权利要求1所述的小分子药物血药浓度的检测方法，其特征在于，还包括：

第一次洗脱：在所述制备光纤探针后，洗脱未固定至链霉亲和素芯片表面的特异性小分子药物单克隆抗体；

第二次洗脱：在所述参照样本的竞争性结合和信号放大步骤、所述待测样本的竞争性结合和信号放大步骤中，在竞争性结合后，洗脱未与特异性小分子药物单克隆抗体结合的小分子药物-辣根过氧化物酶偶联物。

4.根据权利要求1所述的小分子药物血药浓度的检测方法，其特征在于，所述血液对照品为未使用小分子药物者的全血基质、血清或血浆；

所述小分子药物血药浓度待测者的血液样本为小分子药物血药浓度待测者的全血基质、血清或血浆。