[发明专利]用于真核微生物快速计数的试剂、装置及方法

权利要求书

1.用于真核微生物快速计数的试剂，其特征在于，所述试剂包括渗透缓冲液、荧光染色液以及复溶液；

其中，所述渗透缓冲液包括以下组分：ε-聚赖氨酸、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、甘氨酸；

所述荧光染色液中染色组分选自荧光素二乙酸酯、5(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯、5-氯甲基荧光素二乙酸酯、5(6)-羧基荧光素二乙酸酯、6-羧基荧光素二乙酸酯、5-羧基荧光素二乙酸酯、5-硝基-二乙酸荧光素和6-硝基-二乙酸荧光素中的一种或几种。

2.如权利要求1所述的用于真核微生物快速计数的试剂，其特征在于，

所述渗透缓冲液中，各组分的含量为：ε-聚赖氨酸的摩尔浓度为50μmol/L～400μmol/L、十二烷基-β-D-麦芽糖苷质量百分数为0.1％～0.5％、甘氨酸的摩尔浓度为1mmol/L～10mmol/L。

3.如权利要求1所述的用于真核微生物快速计数的试剂，其特征在于，

所述复溶液为二甲基亚砜。

4.如权利要求1所述的用于真核微生物快速计数的试剂，其特征在于，

所述荧光染色液的浓度为100～500μg/mL。

5.一种用于真核微生物快速计数的装置，其特征在于，所述装置包括微生物培养盒以及权利要求1-4中任一所述试剂；

其中，所述微生物培养盒具有一盒体，所述盒体包括容纳槽以及与所容纳槽配合的盖体，所述容纳槽内从槽的底部向上依次铺设有第一吸水纸、第二吸水纸以及滤膜；

所述盖体内设有用于将所述第一吸水纸、第二吸水纸以及滤膜压于所述容纳槽底部的压板。

6.如权利要求5所述的用于真核微生物快速计数的装置，其特征在于，

所述滤膜为孔径为0.8μm的混合纤维素酯滤膜。

7.如权利要求5所述的用于真核微生物快速计数的装置，其特征在于，

所述装置还包括荧光检测仪。

8.一种利用权利要求5所述的装置检测真核微生物的方法，其特征在于，

所述方法包括以下步骤：

步骤一、取含待测真核微生物样品；

步骤二、将所述含待测真核微生物样品加入到所述滤膜上，待其完全吸收后，弃掉所述第二吸水纸；

步骤三、将所述滤膜贴合于所述第一吸水纸上；

步骤四、向所述容纳槽内加入培养基培养一定时间；

步骤五、向所述培养后的容纳槽内加入渗透缓冲液和用复溶液配制的荧光染色液；

步骤六、将所述容纳槽置于培养箱内倒置培养后，用荧光检测仪计数检测。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，

所述培养基为30g/L的麦芽浸粉、20g/L的葡萄糖、5g/L的大豆蛋白胨、2g/L的酵母浸粉、1g/L的磷酸二氢钾、0.5g/L的硫酸镁、5mg/L的维生素B2、0.1g/L的氯霉素，溶剂为蒸馏水。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，

所述真核微生物为霉菌或酵母菌。