[发明专利]一种引物组合及其在检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的应用在审
申请号: | 202111442681.3 | 申请日: | 2021-11-30 |
公开(公告)号: | CN114182029A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 王世杰;杨婉秋;胡连霞;张树飞;袁庆彬;薛玉玲;冯丽莉;荀一萍;张栋 | 申请(专利权)人: | 石家庄君乐宝乳业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/01 |
代理公司: | 石家庄科诚专利事务所(普通合伙) 13113 | 代理人: | 杨亚慧;苏兴娟 |
地址: | 050000 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 引物 组合 及其 检测 乳制品 中阪崎克罗诺 杆菌 应用 | ||
1. 一种引物组合,由外引物、内引物和环引物组合而成,其特征在于,所述外引物、内引物和环引物及其序列分别为:
外引物F3:5’- CCGTTAAAGTGCC -3’、
外引物B3:5’- GCTTTACGTGCCGC -3’、
内引物FIP:5’- TGCTGCTCAACCGCCGATTTCTCCTCCCAGACCAAAGACA -3’、
内引物BIP:5’- GATGAACGAGCTGCTGGCCGTCGATAATTTTGCCGA -3’、
环引物LF:5’- CACCTCGGAGGAGACC -3’和
环引物LB:5’- CTGCTGGAGAACCC -3’。
2.权利要求1所述的一种引物组合在检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述一种引物组合用于检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的检测方法,是以模板为待测乳制品中的DNA、引物为所述的一种引物组合的RealAmp反应体系进行反应,实时监测荧光强度,反应结果呈阳性则待测样品中含阪崎克罗诺杆菌,反应结果呈阴性则待测样品中不含阪崎克罗诺杆菌。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述RealAmp反应体系,以物质的量份数计,包括0.1-0.4份所述外引物F3、0.1-0.4份所述外引物B3、1.1-1.5份所述内引物FIP、1.1-1.5份所述内引物BIP、0.5-1.2份所述环引物LF、0.5-1.2份所述环引物LB,还包括0.4×103-2×103份dNTPs和0.2×106-0.5×106份甜菜碱。
5. 根据权利要求2-4中任一项所述的应用,其特征在于,所述外引物、所述内引物和所述环引物的终浓度比为1: 7: 3。
6.根据权利要求3-4中任一项所述的应用,其特征在于,所述反应的温度为50-70℃。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述反应的温度为50-70℃。
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