[发明专利]一种引物组合及其在检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的应用在审

专利信息
申请号: 202111442681.3 申请日: 2021-11-30
公开(公告)号: CN114182029A 公开(公告)日: 2022-03-15
发明(设计)人: 王世杰;杨婉秋;胡连霞;张树飞;袁庆彬;薛玉玲;冯丽莉;荀一萍;张栋 申请(专利权)人: 石家庄君乐宝乳业有限公司
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/01
代理公司: 石家庄科诚专利事务所(普通合伙) 13113 代理人: 杨亚慧;苏兴娟
地址: 050000 *** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 一种 引物 组合 及其 检测 乳制品 中阪崎克罗诺 杆菌 应用
【权利要求书】:

1. 一种引物组合,由外引物、内引物和环引物组合而成,其特征在于,所述外引物、内引物和环引物及其序列分别为:

外引物F3:5’- CCGTTAAAGTGCC -3’、

外引物B3:5’- GCTTTACGTGCCGC -3’、

内引物FIP:5’- TGCTGCTCAACCGCCGATTTCTCCTCCCAGACCAAAGACA -3’、

内引物BIP:5’- GATGAACGAGCTGCTGGCCGTCGATAATTTTGCCGA -3’、

环引物LF:5’- CACCTCGGAGGAGACC -3’和

环引物LB:5’- CTGCTGGAGAACCC -3’。

2.权利要求1所述的一种引物组合在检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述一种引物组合用于检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌的检测方法,是以模板为待测乳制品中的DNA、引物为所述的一种引物组合的RealAmp反应体系进行反应,实时监测荧光强度,反应结果呈阳性则待测样品中含阪崎克罗诺杆菌,反应结果呈阴性则待测样品中不含阪崎克罗诺杆菌。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述RealAmp反应体系,以物质的量份数计,包括0.1-0.4份所述外引物F3、0.1-0.4份所述外引物B3、1.1-1.5份所述内引物FIP、1.1-1.5份所述内引物BIP、0.5-1.2份所述环引物LF、0.5-1.2份所述环引物LB,还包括0.4×103-2×103份dNTPs和0.2×106-0.5×106份甜菜碱。

5. 根据权利要求2-4中任一项所述的应用,其特征在于,所述外引物、所述内引物和所述环引物的终浓度比为1: 7: 3。

6.根据权利要求3-4中任一项所述的应用,其特征在于,所述反应的温度为50-70℃。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述反应的温度为50-70℃。

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