[发明专利]用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用

说明书

本发明涉及分子生物技术领域，特别涉及用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用，用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合包括与膀胱癌人群早期甲基化位点相关的3对靶标特异引物、3个特异性引物探针及对应的内参引物、内参引物探针。与现有技术相比，本发明最终筛选出3对可以在甲基化敏感内切酶的辅助下对HOXB13基因甲基化水平进行判定的PCR效率高，特异性强，稳定性好的引物及对应探针序列，检测简单易行、判读客观，避免了人为判读结果的主观性，提高了准确率；可以区分胃癌患者与健康人群，用于肿瘤的早期筛查、早期诊断、疗效评价和追踪以及预后评估。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别涉及用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用。

背景技术

胃癌的发病率在全世界范围内排在前列，由于胃癌在组织学和病因学上具有非常高的异质性，不同的治疗方案在临床上也产生各种各样的结果。因此如何准确的预测胃癌病人的生存和预后风险具有非常重要的临床意义。

胃癌发病有明显的地域性差别，在我国的西北与东部沿海地区胃癌发病率比南方地区明显高，年龄在50岁以上，男女发病率比为2：1。胃癌可发生于位的任何部位，胃大弯、胃小弯、前后壁均可受累。早期胃癌预后较中晚期胃癌更好治疗，因此，诊断早期胃癌极为重要。目前早期胃癌的诊断主要依赖于内镜技术，但内镜技术属于侵入性检查，存在痛苦大、费用高等局限性，因此收筛查条件、人群、接受程度及就医成本的制约，尚无法成为大规模筛查的检测手段。

发明内容

针对以上述背景技术的不足，本发明提供一种用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合、试剂盒及应用，解决了胃部肿瘤检测敏感度低，特异性差，避免膀胱镜检查引发的并发症的问题。

本发明采用的技术方案如下：用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合，关键在于：包括与膀胱癌人群早期甲基化位点相关的3对靶标特异引物、3个特异性引物探针及对应的内参引物、内参引物探针；其中所述3对靶标特异引物的序列如下：

Seq ID NO.1：F-TCGCCACCGACCCCACTAC，

Seq ID NO.2：R-GCATTCTCCACGATTGAGCGCACAG；

Seq ID NO.3：F-GAGATCTTGCGCCTCTTGTCCTTG，

Seq ID NO.4：R-CAAGAAACGCATTCCGTACAGC；

Seq ID NO.5：F-TTGACAGCAGGCATCAGCGTA，

Seq ID NO.6：R-CCAAGGATATCGAAGGCTTGCTGG；

内参引物的序列如下：

Seq ID NO.7：F-GGTGCCAGATTTTCTCCATGTCGTC，

Seq ID NO.8：R-ACGAGGCCCAGAGCAAGAGA；

所述特异性引物探针序列如下：

Seq ID NO.9：FAM-ACAACCCGCAGAACCGAAGCTCC-BHQ1，

Seq ID NO.10：FAM-TTGTTAGCCGCATACTCCCGCTCC-BHQ1；

Seq ID NO.11：FAM-TCGCCCACTCCCCTCTGACC-BHQ1；

内参引物探针序列如下：

Seq ID NO.12：VIC-TACCCCATCGAGCACGGCATCGTC-BHQ1。

用于膀胱癌早期筛查的试剂盒，关键在于：包括用于胃部肿瘤筛查的生物标志物组合及甲基化敏感内切酶体系。