[发明专利]一种高纯度CD56+γδT细胞及其制备方法和用途在审
| 申请号： | 202111429090.2 | 申请日： | 2021-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN114107200A | 公开（公告）日： | 2022-03-01 |
| 发明（设计）人： | 方小燕;徐南;康立清;俞磊;谭靖雯;叶晶;贾裕杰 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学;上海优卡迪生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海市汇业律师事务所 31325 | 代理人： | 王函 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纯度 cd56 细胞 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种制备高纯度CD56+γδT细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)从血液中利用淋巴细胞分离液制备PBMC；
(2)使用分选抗体和磁珠，从PBMC中制备纯度90％以上的γδT细胞；
(3)诱导和扩增：将步骤(2)得到的γδT细胞，加入培养基，放入二氧化碳培养箱37℃，5％CO2培养2-3周；所述培养基选自以下方案：1)在含5％FBS的T009培养基的基础上，外加成分由10～200ng/ml IL15和10～1000ng/ml L-抗坏血酸-2-磷酸盐组成；2)在含5％FBS的T009培养基的基础上，外加成分由10～200ng/ml IL15、10～1000ng/ml L-抗坏血酸-2-磷酸盐和10～200ng/ml IL21组成；3)在含5％FBS的T009培养基的基础上，外加成分由10～200ng/ml IL15、10～1000ng/ml L-抗坏血酸-2-磷酸盐、10～200ng/ml IL21和100～1000IU IL2组成；4)在含5％FBS的T009培养基的基础上，外加成分由10～200ng/ml IL15、10～1000ng/ml L-抗坏血酸-2-磷酸盐、10～200ng/ml IL4和100～1000IUIL2组成；
所述高纯度CD56+γδT细胞指，γδT细胞占细胞总数的90％以上，CD56高表达的CD56+γδT细胞占γδT细胞总数的75％以上。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，使用的分选抗体为γδTCR抗体。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，每隔1-3天计数，补液，控制细胞浓度在5*105～5*106个/ml。
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