[发明专利]一种pH敏感脂质体及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种pH敏感脂质体及其制备方法与应用。所述pH敏感脂质体由以下物质的量的药物和脂质体载体组成：摩尔比为(2～5)：(0.5～1.5)：(0.5～1.5)：(0.1～0.3)的(2,3‑二油酰基‑丙基)‑三甲基铵‑氯盐：二油酰磷脂酰胆碱：胆固醇琥珀酸单酯：DSPE‑PEGn‑pep；ICD诱导剂与(2,3‑二油酰基‑丙基)‑三甲基铵‑氯盐、二油酰磷脂酰胆碱和胆固醇琥珀酸单酯的总质量比为(5～12)：100；腺苷通路阻断剂与ICD诱导剂的质量比为(0.5～2)：(0.5～3)。ICD诱导剂和腺苷通路抑制剂两药连用克服了仅使用ICD诱导剂治疗的抗肿瘤疗效差、肿瘤免疫逃避的问题，利用脂质体载体实现ICD诱导剂和腺苷通路抑制剂的体内共同递送；POL的pH敏感特性有效保证POL在血液循环过程中保持稳定。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种pH敏感脂质体及其制备方法与应用。

背景技术

公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

化学疗法是最经典的癌症治疗方法之一，例如使用蒽环类药物等细胞毒性药物，如奥沙利铂、米托蒽醌、阿霉素、环磷酰胺等，可以通过诱导肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡(ICD)来增强抗肿瘤免疫效应。在此过程中产生的三磷酸腺苷ATP可以招募DC，从而激活T细胞和记忆T细胞的成熟和向肿瘤的浸润，引发抗癌免疫反应。然而不幸的是，仅依赖于ICD诱导剂的治疗在患者中的应答率仍然很低，临床效果不尽人意。主要原因为ICD诱导后产生的免疫刺激的ATP会被肿瘤微环境中高表达的CD39和CD73迅速降解为免疫抑制性腺苷，腺苷与免疫细胞或者肿瘤细胞上表达的G蛋白偶联腺苷受体A2a(A2aR)结合，导致免疫逃逸和恶性肿瘤进展。仅使用ICD诱导剂治疗存在抗肿瘤疗效差、肿瘤免疫逃避的这一问题有待改善和解决。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种pH敏感脂质体及其制备方法与应用，本发明利用纳米脂质体实现腺苷通路阻断剂与ICD诱导剂的联合递送，提供一种更安全、更可控的癌症化学免疫联合疗法。

在使用ICD诱导剂治疗肿瘤的过程中，对于ATP-腺苷通路中关键酶的抑制(抑制CD39，抑制CD73和抑制腺苷与免疫细胞上表达的A2aR的结合)具有改善实体肿瘤免疫治疗的潜力；并且CD39抑制剂的使用除限制腺苷的产生而减轻诱导的免疫抑制外，与A2AR或CD73抑制剂相反，阻断CD39的一个不同作用是保护免疫刺激性ATP库，因为三磷酸腺苷的有效释放和积累似乎对化疗后的免疫原性反应至关重要。除此之外，CD39在调节性T细胞中高表达，而CD73在这类细胞中基本上不表达。抑制CD39对抑制髓系细胞的功能也有很强的作用，从而也会增强效应T细胞的功能。

然而，除了肿瘤部位外，CD39在全身免疫系统内、血管内皮上和不同的细胞类型和器官中也均有广泛表达，如在肾脏中，CD39表现在血管内皮和皮层和间质的收集管道内，在肝脏内、肺部和肠道等也有表达。因此，CD39强抑制剂的直接使用极有可能导致“免疫相关不良事件”。同时无靶向或者不精准的的化疗也会破坏免疫细胞的活性，免疫疗法和化学疗法两者无序的非精准组合性治疗产生的毒性也更高。本发明提供的pH敏感脂质体可以更安全、更可控地实现CD39抑制剂与ICD诱导剂的联合递送，增加病变组织内药物的积累，更有效地靶向期望的肿瘤和/或免疫细胞，并减少脱靶的副作用。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下所述：

在本发明的第一方面，提供一种pH敏感脂质体，所述pH敏感脂质体由以下药物和脂质体载体组成：

(2,3-二油酰基-丙基)-三甲基铵-氯盐(DOTAP)，二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)，胆固醇琥珀酸单酯(CHEMS)，DSPE-PEGn-pep，ICD诱导剂和腺苷通路阻断剂。