[发明专利]提高纤维素酶活的基因及在中药饲料添加剂中的应用

说明书

本发明公开了一种提高纤维素酶活的基因、蛋白和菌株，基因为trans1基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；菌株为黑曲霉Trans，由pCAMBIA1300‑trans1重组质粒转化至黑曲霉CBS S13.88而得；菌株的构建方法包括：对pCAMBIA1300质粒和trans1基因进行Sal I和Hind III酶切，多酶切产物电泳、胶回收；对胶回收产物进行连接，得重组质粒pCAMBIA1300‑trans1；将重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞中，并提取重组质粒；将提取的重组质粒转化农杆菌中，并以农杆菌介导侵染黑曲霉菌，获得黑曲霉Trans菌。

技术领域

本发明涉及微生物和动物中药饲料技术领域，更具体地说是涉及提高纤维素酶活的基因及在中药饲料添加剂中的应用。

背景技术

长期以来，化学药品、抗生素和激素的毒副作用和耐药性一直都是困扰医学专家的重要因素，尤其是容易引起动物产品药物残留，这已成为一个全社会关注的问题。中药的毒副作用小，无耐药性，不会在肉、蛋、奶等畜产品中产生有害残留，是中药添加剂的一个独特优势，这一优势，顺应了时代潮流，满足了人们回归自然、追求绿色食品的愿望。

中药具有营养和药物的双重作用，其内含有多种成分，包括多糖、生物碱、苷类等。中药在动物肠道内，要发挥药效，活性成分必须从组织中释放出来。但是中药活性成分往往被纤维素等包裹，因此，降解纤维素成为中药有效成分释放的关键。现有的纤维素酶虽然能够降解纤维素，但是活性较低。

纤维素酶的生产需要有安全无毒的高效表达纤维素酶的菌株。黑曲霉菌株是饲料添加剂目录里面的菌株，其具有营养简单，生长繁殖快，安全无毒等优点。

因此，如何提供一种可以提高纤维素酶活的基因，以该基因构建菌株，并将菌株应用于中草药饲料添加剂中是本领域技术人员亟需解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种基因，该基因编码的蛋白可以对与纤维素酶运输关联的蛋白进行修饰，调节纤维素运输关联蛋白的表达强度，提高酶活。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种提高纤维素酶活的基因，所述基因为trans1基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

一种提高纤维素酶活的蛋白，所述蛋白由trans1基因编码而得，氨基酸序列如SEQID NO.2所示。

一种高产纤维素酶活的菌株，所述菌株为黑曲霉Trans；黑曲霉Trans由pCAMBIA1300-trans1重组质粒转化至黑曲霉CBS S13.88而得。

一种高产纤维素酶活的菌株的构建方法，包括下述步骤：

1)酶切：对pCAMBIA1300质粒和trans1基因进行Sal I和Hind III酶切，多酶切产物电泳、胶回收；

2)连接：对胶回收产物进行连接，得重组质粒pCAMBIA1300-trans1；

3)转化、提取：将重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞中，并提取重组质粒；

4)转化、介导：将提取的重组质粒转化农杆菌中，并以农杆菌介导侵染黑曲霉菌，获得黑曲霉Trans菌株。

所述的trans1基因在中草药饲料添加剂中的应用。

所述的蛋白在中草药饲料添加剂中的应用。

所述的菌株在中草药饲料添加剂中的应用。

具体实施方式