[发明专利]一种稀土纳米探针的抗体修饰方法

权利要求书

1.一种稀土纳米探针的抗体修饰方法，其特征在于，包括：

利用高温热分解方法制备均匀的稀土发光纳米探针，并用盐酸去除稀土发光纳米探针在制备过程中混杂的配体，将稀土发光纳米探针与含有巯基的配体混合，使稀土发光纳米探针表面包含巯基基团；

将蛋白A分子与含有马来酰亚胺基和羧基琥珀酰亚胺基的有机物进行混合，使蛋白A分子表面引入马来酰亚胺基；

将包含巯基的稀土发光纳米探针与引入马来酰亚胺基的蛋白A分子混合，使稀土发光纳米探针与蛋白A相连，并于抗体分子混合，得到抗体修饰的稀土发光纳米探针；

将稀土氯化物与十八烯、油酸在氩气环境下加热至100-200℃，维持至少30分钟，使稀土氯化物完全溶解得到淡黄色的澄清溶液，冷却至室温；

加入甲醇加热至70-90℃，保持至少30分钟，使甲醇完全蒸发，继续加热至280-320℃，保持至少90分钟后冷却至室温，利用乙醇离心纯化，取离心物分散于正己烷中得到稀土发光纳米探针；

其中，稀土发光纳米探针为：Yb/Tm、Yb/Er或Lu掺杂荧光材料；

含有巯基的配体为：DSPE-PEG2000-SH；

含有马来酰亚胺基和羧基琥珀酰亚胺基的有机物为磺基琥珀酰亚胺基-4-（N-马来酰亚胺甲基）环己烷-1-羧酸酯SMCC；

抗体为人IgG抗体、兔抗羊IgG抗体或anti-HER2 抗体。

2.根据权利要求1所述的抗体修饰方法，其特征在于，取正己烷混合物并加入盐酸，超声至少3小时去除混杂的配体，离心至少20分钟，取离心物分散于水中 。

3.根据权利要求1所述的抗体修饰方法，其特征在于，将蛋白A溶液和SMCC溶液按照1:5-7的比例混合，室温下搅拌至少1小时，离心，将离心物分散于缓冲液中。

4.根据权利要求3所述的抗体修饰方法，其特征在于，蛋白A溶液为蛋白A与pH为7.5的HEPES和NaCl的混合液，SMCC溶液为SMCC与pH为7.5的HEPES和NaCl的混合液。

5.根据权利要求1所述的抗体修饰方法，其特征在于，将连接有蛋白A的稀土发光纳米探针与抗体分子混合离心，通过BCA蛋白试剂盒测试离心上清液中未连接的抗体数量以确定稀土发光纳米探针连接的抗体数目。