[发明专利]基于GSDMD蛋白RFWK基序的小分子多肽药物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种小分子多肽药物，其特征在于，所述多肽药物为CMK的活性基团上连接的多肽链含有Arg-Phe-Trp-Lys片段，其中，Arg的氨基被乙酰基取代。

2.根据权利要求1所述的多肽药物结构如式(Ⅰ)所示：

3.根据权利要求1所述的小分子多肽药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)合成具有保护基团的Arg-Phe-Trp肽段；

(2)将Arg-Phe-Trp肽段进行乙酰基取代，得到具有保护基团的中间体Ac-Arg-Phe-Trp-OH；

(3)合成具有保护基团的Lys-CMK；

(3)将步骤(2)得到的中间体Ac-Arg-Phe-Trp-OH与步骤(3)得到的具有保护基团的Lys-CMK偶联得到具有保护基团的Ac-Arg-Phe-Trp-Lys-CMK；

(4)将步骤(3)得到的化合物脱保护基，得到Ac-Arg-Phe-Trp-Lys-CMK。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)：称取取代度为0.3mmol/g Fmoc-Trp(Boc)-CTC Resin，脱保护；按当量比3：2.85：6投入原料氨基酸、HBTU以及NMM，加入DMF没过树脂，鼓氮气反应30min，树脂取样茚三酮检测透明；

(2)重复步骤(1)的步骤，依次向反应体系依次加入原料Fmoc-Phe-OH以及Fmoc-Arg(Pbf)-OH，直至序列偶联至Arg，并脱完保护；

步骤(4)：向步骤(3)得到的反应产物中加入封端液，反应20-40min；

步骤(5)：步骤(4)的反应产物经甲醇洗涤后，抽干反应器内树脂，转移至切割管中，加入切割液，产物过滤旋干，得到中间体Ac-Arg(Pbf)-Phe-Trp(Boc)-OH；

步骤(6)：称取Fmoc-Lys(Boc)-OH，用DCM溶解，加入CMK、POCl₃以及TEA，反应4-6h，得Fmoc-Lys(Boc)-CMK，洗涤萃取；

步骤(7)：步骤(6)得到的产物加入含有10-30％二乙胺的四氢呋喃溶液，反应1-3h，拉干得H-Lys(Boc)-CMK；

步骤(8)：将步骤(5)得到的Ac-Arg(Pbf)-Phe-Trp(Boc)-OH片段和步骤(7)得到的H-Lys(Boc)-CMK片段偶联得到Ac-Arg(Pbf)-Phe-Trp(Boc)-Lys(Boc)-CMK；将得到的保护片段中加入切割液，反应1.5-2h；

步骤(9)：抽滤步骤(8)得到的切割液，随后将切割滤液收集至离心管中，加入冰乙醚，离心机沉淀收集固体，洗涤，得到Ac-Arg-Phe-Trp-Lys-CMK。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的封端液为体积比为10：6：84的乙酸酐、NMM与DMF的混合溶液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，所述的切割液为体积比为20：80的TFE与DCM的混合溶液；步骤(8)中，所述的切割液为体积比为95：2.5：2.5的TFA、EDT与H₂O的混合溶液。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，所述的Fmoc-Lys(Boc)-OH与CMK、POCl₃以及TEA的摩尔比为1:1.1:2:3。

8.一种如权利要求1所述的小分子多肽药物在制备治疗脓毒症疾病的药物中的应用。

9.一种如权利要求1所述的小分子多肽药物在制备治疗炎症性疾病的药物的用途。