[发明专利]DNA网络水凝胶、制备方法及其组合物

权利要求书

1.一种DNA网络水凝胶，其特征在于，包括

网络水凝胶载体，具有DNA链所形成的网络结构；

HhaI@TGMS纳米颗粒，负载于所述网络水凝胶载体。

2.如权利要求1所述的DNA网络水凝胶，其特征在于，所述网络水凝胶载体至少由RCA产物一、RCA产物二共混后形成，所述RCA产物一、RCA产物二共混的体积比为1：(1-5)，其中，

所述RCA产物一其组成至少包括，以每100微升计：(5×10^-3～1×10^-2)nmol的环状DNA模板一、(3～5)U的phi 29DNA聚合酶、终浓度为1×phi 29DNA聚合酶缓冲液、终浓度为(0.1～0.4)微克/微升的BSA、(0.05～0.1)nmol的dNTPs、终浓度(60～80)mmol/L的NaCl；

所述RCA产物二其组成至少包括，以每100微升计：(5×10^-3～1×10^-2)nmol的环状DNA模板二，(3～5)U的phi 29DNA聚合酶，终浓度为1×phi29 DNA聚合酶缓冲液，终浓度为(0.1～0.4)微克/微升的BSA，(0.05～0.1)nmol的dNTPs，终浓度(60～80)mmol/L的NaCl。

3.如权利要求2所述的DNA网络水凝胶，其特征在于，所述环状DNA模板一为由具有末端缺口的环状DNA-1与T4 DNA连接酶反应获得，所述环状DNA-1为经5’端磷酸化修饰的ssDNA-1和引物一反应获得，所述ssDNA-1的碱基数为95～130，所述引物一的碱基数为20～37，并且所述ssDNA-1的5’端和3’端分别与引物一的3’端和5’端互补配对。

4.如权利要求1所述的DNA网络水凝胶，其特征在于，所述环状DNA模板二为由具有末端缺口的环状DNA-2与T4 DNA连接酶反应获得，所述环状DNA-2为经5’端磷酸化修饰的ssDNA-2和引物二反应获得，所述ssDNA-2的碱基数为95～130，所述引物二的碱基数为20～37，ssDNA-2的5’端和3’端分别与引物二的3’端和5’端互补配对。

5.如权利要求1所述的DNA网络水凝胶，其特征在于，所述HhaI@TGMS纳米颗粒为：在1.5mL离心管中混合50U的HhaI和480～500μL 0.5mg/mLTGMS，之后在pH＝7～9的磷酸盐缓冲液中在4℃条件下超声1小时，分离获得。

6.如权利要求1所述的DNA网络水凝胶，其特征在于，所述HhaI@TGMS纳米颗粒为：混合50U的HhaI和480～500μL 0.5mg/mL TGMS，再在pH＝7-9的磷酸盐缓冲液中在0～6℃条件下超声0.5-2小时，分离获得。

7.如权利要求1～6任一所述的DNA网络水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

获取DNA网络水凝胶，构建网络水凝胶载体；

所述网络水凝胶载体吸附HhaI@TGMS纳米颗粒。

8.DNA网络水凝胶组合物，包括如权利要求1～6任一所述的DNA网络水凝胶。

9.根据权利要求8所述的DNA网络水凝胶组合物，其特征在于，还包括由所述DNA网络水凝胶捕获的T淋巴细胞。

10.根据权利要求9所述的DNA网络水凝胶组合物，其特征在于，所述DNA网络水凝胶对T淋巴细胞的捕获为：将含有T淋巴细胞的细胞液与RCA产物一共孵育后，再与RCA产物二混合孵育。