[发明专利]衔接体、复合物、单链分子、试剂盒、方法和应用

权利要求书

1.一种用于表征生物分子的衔接体，其特征在于，包括：

主体链，用于与待测生物分子和多核苷酸结合蛋白结合；和

连接链，包括连接区域和侧链区域，所述连接区域与所述主体链连接，所述侧链区域用于与外部连接物连接，所述侧链区域与所述多核苷酸结合蛋白的结合能力弱于所述主体链与所述多核苷酸结合蛋白的结合能力，或所述侧链区域不结合所述多核苷酸结合蛋白。

2.根据权利要求1所述的衔接体，其特征在于，所述连接链的侧链区域包括核糖核苷酸(RNA)和/或核酸类似物；

和/或，所述连接链的侧链区域与外部连接物以非共价连接，优选地，以互补配对连接；

和/或，所述连接链的连接区域与所述主体链以非共价连接，优选地，以互补配对连接。

3.根据权利要求2所述的衔接体，其特征在于，所述连接链的侧链区域中的所述核糖核苷酸包括2’位修饰的核糖核苷酸；优选地，所述侧链区域包括2’烷氧基修饰的核糖核苷酸和/或2’甲氧基修饰的核糖核苷酸；

所述核酸类似物包括肽核酸(PNA)、甘油核酸(GNA)、苏糖核酸(TNA)、锁核酸(LNA)、桥核酸(BNA)中的任一种或两种以上任意组合。

4.根据权利要求1至3中任一所述的衔接体，其特征在于，所述主体链包括与所述连接链的连接区域连接的第一部分、用于与多核苷酸结合蛋白结合的装载部分、和/或用于与待测生物分子结合的结合部分；

所述装载部分包括多核苷酸。

5.根据权利要求1至4中任一所述的衔接体，其特征在于，所述多核苷酸结合蛋白为沿3’至5’方向移动的酶，所述装载部分3’端与所述连接区域5’端连接，或

所述多核苷酸结合蛋白为沿5’至3’方向移动的酶，所述装载部分5’端与所述连接区域3’端连接；

和/或，所述多核苷酸结合蛋白选自聚合酶、解旋酶、核酸内切酶、核酸外切酶和DNA结合蛋白酶中的任一种或两种以上任意组合。

6.一种核酸蛋白复合物，包括根据权利要求1至5中任一项所述的衔接体和多核苷酸结合蛋白，所述多核苷酸结合蛋白与所述主体链结合。

7.一种单链分子，包括权利要求1-5中任一项所述的连接链。

8.一种表征生物分子的方法，包括：

(a)将多核苷酸结合蛋白、待测生物分子与权利要求1至5中任一项所述的衔接体结合，形成第一复合物；

(b)将所述第一复合物与设有外部连接物的跨膜纳米孔或所述跨膜纳米孔所在的分子膜接触；

(c)使所述待测生物分子穿过并相对于所述跨膜纳米孔移动，获取一个或多个测量值，其中所述测量值代表所述待测生物分子的一个或多个特征，且由此表征所述待测生物分子。

9.一种用于表征生物分子的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1至5中任一项所述的衔接体、如权利要求6所述的核酸蛋白复合物、或如权利要求7所述的单链分子，优选地，还包括多核苷酸结合蛋白和/或权利要求8所述分子膜的膜组分和/或权利要求8所述外部连接物。

10.一种如权利要求1至5所述的衔接体、或如权利要求6所述的核酸蛋白复合物、或如权利要求7所述的单链分子、或如权利要求8所述的表征生物分子的方法、或如权利要求9所述的试剂盒在表征生物分子或制备表征生物分子产品中的应用；

优选地，所述生物分子包括多核苷酸、多肽、多糖、或脂质；

更优选地，所述多核苷酸包括DNA或RNA；和/或，所述表征的特征选自(i)所述多核苷酸的长度；(ii)所述多核苷酸的一致性；(iii)所述多核苷酸的序列；(iv)所述多核苷酸的二级结构和(v)所述多核苷酸是否经修饰。