[发明专利]适用于难治性血管新生性眼疾病基因治疗的慢病毒载体

权利要求书

1.一种非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述载体系统的包装质粒包括表达包膜蛋白的pMD.2G、表达REV蛋白的pRSV-REV、整合酶突变失活的pMDlg/pRRE-IN mut和表达VEGFA抗体基因的载体质粒。

2.根据权利要求1所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述整合酶的氨基酸序列包括如SEQ ID NO.2所示序列。

3.根据权利要求1所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述整合酶的基因序列包括如SEQ ID NO.1所示序列。

4.根据权利要求1所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述VEGFA抗体基因是在雷珠单抗的重链和轻链可变区分别加上人源IgG的Fc片段恒定区CH₃，并对基因进行密码子优化而得。

5.根据权利要求4所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述VEGFA抗体基因由重链和轻链组成；重链的氨基酸序列为SEQ ID NO.5，轻链的氨基酸序列为SEQ IDNO.7。

6.根据权利要求4所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述VEGFA抗体基因的重链的基因序列如SEQ ID NO.4所示，轻链的基因序列为SEQ ID NO.6所示。

7.根据权利要求1所述的非整合型慢病毒载体系统，其特征在于，所述载体质粒为pCCL-PGK-antiVEGFA，载体序列如SEQ ID NO.3所示。

8.一种根据权利要求1-7中任一项所述的非整合型慢病毒载体系统的制备方法，其特征在于，将所述质粒pMD.2G、pRSV-REV、整合酶突变失活的pMDlg/pRRE-IN mut和载体质粒共转染进宿主细胞，浓缩、纯化，得到能表达抗VEGFA抗体的非整合型慢病毒系统。

9.一种根据权利要求1-7中任一项所述的非整合型慢病毒载体系统在制备治疗难治性血管新生性眼疾病的制剂中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述制剂包括治疗血管新生性年龄相关性黄斑变性疾病、糖尿病视网膜病变相关黄斑水肿或视网膜静脉阻塞相关黄斑水肿的制剂。