[发明专利]一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法

说明书

本发明公开了一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，涉及皮肤溃疡技术领域。本发明具体步骤如下：巴马小型猪糖尿病模型构建，在巴马小型猪体内构建糖尿病模型；3D打印异物填塞设计，在猪表皮造创并在创口内部填充异物；糖尿病慢性皮肤溃疡模型构建，在猪创口内构建慢性皮肤溃疡模型。本发明通过适用于皮肤组织较厚的大动物模型，尤其是猪；并且从多个角度对模型形成进行评估，从致病因素、病理变化与机制改变更好的模拟了糖尿病慢性皮肤溃疡的形成。

技术领域

本发明属于皮肤溃疡技术领域，特别是涉及一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法。

背景技术

糖尿病慢性皮肤溃疡发病机制复杂，存在动物模型构建困难，临床治疗效果欠佳问题；

现有糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方式主要包括：局部放疗、局部施加压力、创造缺血性皮瓣或动脉结扎等方法；其中放疗导致的慢性创面不符合糖尿病及其并发症相关的慢性创面致病机制；缺血性皮瓣往往较大，不适宜在单个猪背部进行多处造创，需要的实验动物个体数量较多，实验成本高；动脉结扎后造创，适用于四肢远端的创面模型，同样存在单个动物造创数量有限，且对实验人员有较高的手术技能要求，存在技术难度高、实验成本高问题。

发明内容

本发明的目的开发一种经济实用，易生产，且适宜较厚皮肤的猪慢性皮肤溃疡构建模型；同时提供慢性创面形成时间、病理变化与机制变化多个角度评估标准，检验其成模效益。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，具体步骤如下：

巴马小型猪糖尿病模型构建，在巴马小型猪体内构建糖尿病模型；

3D打印异物填塞设计，在猪表皮造创并在创口内部填充异物；

糖尿病慢性皮肤溃疡模型构建，在猪创口内构建慢性皮肤溃疡模型。

进一步地，所述巴马小型猪糖尿病模型构建具体步骤如下：

分组，雄性未去势巴马小型猪适应性喂养5周后，按照完全随机设计中的非平衡设计随机分为两组，实验组6只(D1-D6)，对照组2只(C1、 C2)；

巴马小型猪糖尿病模型的建立，对两组进行不同方案饲养，实验组：高脂高糖饲料喂养，对照组：对照饲料喂养；

饲养条件，温度控制在18～22℃，光照、黑暗各12小时/日，分笼喂养，自由饮水；

STZ注射，对实验组体内注射STZ；

血糖、胰岛素监测，检测实验组体内的血糖以及胰岛素数据。

进一步地，所述3D打印异物填塞设计具体步骤如下：

填塞异物设计，根据不同部位创面深度设计不同长度柱体，柱体填塞创面后给予局部异物接触与压迫作用；

具体设计方案，3D打印异物耗材设计软件为：solidworks，耗材生产通过FDM热熔堆积生产工艺采用Allect 334机器进行生产；

造创，全麻后在小型猪脊柱两侧旁开3cm，使用手术刀切割5～6个直径为3cm的皮肤全层创面，创面间隔3～4cm；

慢性创面定义及其评估指标；

HE染色；

免疫荧光检测巨噬细胞标记物；

实时荧光定量PCR检测炎症因子mRNA动态变化。

进一步地，所述造创具体步骤如下：

术前准备，手术前一天为小型猪称重、备皮和标记好拟造创部位；