[发明专利]一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法

权利要求书

1.一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，其特征在于：具体步骤如下：

巴马小型猪糖尿病模型构建，在巴马小型猪体内构建糖尿病模型；

3D打印异物填塞设计，在猪表皮造创并在创口内部填充异物；

糖尿病慢性皮肤溃疡模型构建，在猪创口内构建慢性皮肤溃疡模型。

2.根据权利要求1所述的一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，其特征在于：所述巴马小型猪糖尿病模型构建具体步骤如下：

分组，雄性未去势巴马小型猪适应性喂养5周后，按照完全随机设计中的非平衡设计随机分为两组，实验组6只(D1-D6)，对照组2只(C1、C2)；

巴马小型猪糖尿病模型的建立，对两组进行不同方案饲养，实验组：高脂高糖饲料喂养，对照组：对照饲料喂养；

饲养条件，温度控制在18～22℃，光照、黑暗各12小时/日，分笼喂养，自由饮水；

STZ注射，对实验组体内注射STZ；

血糖、胰岛素监测，检测实验组体内的血糖以及胰岛素数据。

3.根据权利要求1所述的一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，其特征在于：所述3D打印异物填塞设计具体步骤如下：

填塞异物设计，根据不同部位创面深度设计不同长度柱体，柱体填塞创面后给予局部异物接触与压迫作用；

具体设计方案，3D打印异物耗材设计软件为：solidworks，耗材生产通过FDM热熔堆积生产工艺采用Allect 334机器进行生产；

造创，全麻后在小型猪脊柱两侧旁开3cm，使用手术刀切割5～6个直径为3cm的皮肤全层创面，创面间隔3～4cm；

慢性创面定义及其评估指标；

HE染色；

免疫荧光检测巨噬细胞标记物；

实时荧光定量PCR检测炎症因子mRNA动态变化。

4.根据权利要求3所述的一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，其特征在于：所述造创具体步骤如下：

术前准备，手术前一天为小型猪称重、备皮和标记好拟造创部位；

器械与耗材的准备，灭菌手术刀，剪刀(大，小)，镊子(有齿，无齿)，纱布，生理盐水，无菌手术衣，手术单，直角钩针，18、10号兽用缝合线，3D填塞异物等，提前准备肾上腺素，尼可刹米注射液急救备用；

麻醉，术前15min耳后皮下注射硫酸阿托品(0.05mg/Kg)，后注射舒泰50(0.08mL/Kg，即4mg/Kg)，诱导麻醉；

创面，碘伏彻底消毒3遍后，使用手术刀沿皮肤标注区域切开皮肤直至脂肪层，去除皮肤全层组织直至深筋膜，形成全层皮肤缺损创面；

创面拍照与描摹，造创缝合结束后，擦干皮肤，对创面进行拍照，分别沿两侧创面边缘描摹用于面积计算；

异物填塞并固定，贴近猪背部皮肤，将圆环固定于皮肤表面，注意需将柱体固定圆孔端垂直于脊柱，便于柱体固定；

改善术后疼痛，在术后3天内肌注盐酸曲马多注射液1-2mL/只/天；后续根据个体状态调整；

造创后敷料交换，换药前30min肌注曲马多镇痛，创后每6天拆除固定缝线，将柱体拔出后，清理创面内坏死组织，后继续填塞清洁消毒后的柱体，并再次固定。

5.根据权利要求3所述的一种糖尿病猪慢性皮肤溃疡模型构建方法，其特征在于：所述慢性创面定义及其评估指标具体步骤如下：

时间评估标准，满足创面面积每周不能缩小10％～15％或超过一个月面积不能缩小50％或创面未愈合至少持续8周中的任意一条，则定义为慢性创面模型建立成功；

HE病理评估指标，对创面组织进行炎症状态评估；

HE新生表皮厚度测量，测量范围为新生肉芽与表皮交界区域，避开乳突区域的全层厚度。