[发明专利]安石榴苷纯化方法及其在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用有效
申请号: | 202111376141.X | 申请日: | 2021-11-19 |
公开(公告)号: | CN113896751B | 公开(公告)日: | 2023-05-12 |
发明(设计)人: | 甘人友;刘毅;刘宏艳;何晓琴;郭欢;夏宇;王柟;马伟 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院都市农业研究所;成都农业科技中心 |
主分类号: | C07H1/08 | 分类号: | C07H1/08;C07H13/08;A61P3/10 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 霍苗 |
地址: | 610213 四川省成都市双流区兴*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石榴 纯化 方法 及其 制备 葡萄 糖苷酶 抑制剂 中的 应用 | ||
1.一种安石榴苷的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)以D101大孔树脂为固定相,以甲醇和水的混合溶剂作为洗脱剂,对安石榴苷提取物进行第一柱层析纯化,所述第一柱层析纯化采用第一梯度洗脱,所述第一梯度洗脱包括依次进行2个梯度,收集第11梯度和第12梯度的洗脱液,得到安石榴苷粗品;
所述梯度洗脱的洗脱程序为:
;
所述安石榴苷提取物的制备方法包括以下步骤:
将石榴皮粉和提取剂混合进行超声提取,得到安石榴苷提取物;所述提取剂为乙醇和水的混合溶剂,所述提取剂中乙醇的体积百分比为40~80%;所述超声提取的条件包括,固液比为1:(10~50),超声功率为500~1050W,提取时间为10~50min;
(2)以C18半制备色谱柱为固定相,以甲醇和水的混合溶剂作为洗脱剂,对所述安石榴苷粗品进行第二柱层析纯化,所述第二柱层析纯化采用第二梯度洗脱,所述第二梯度洗脱包括依次进行2个梯度,收集第22梯度的洗脱液,得到安石榴苷纯化物;
所述梯度洗脱的洗脱程序为:
。
2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤(1)中,每个梯度洗脱时,所述洗脱剂的流速独立地为28~35mL/min。
3.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤(1)中,所述安石榴苷提取物以所述安石榴苷提取物水溶液的形式进行柱层析纯化,所述安石榴苷提取物水溶液的质量百分比为150~250mg/mL。
4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤(2)中,每个梯度洗脱时,所述洗脱剂的流速独立地为15~25mL/min。
5.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述安石榴苷粗品以所述安石榴苷粗品水溶液的形式进行柱层析纯化,所述安石榴苷粗品水溶液的质量百分比为0.3~0.4mg/mL。
6.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述石榴皮粉的粒径≤0.425mm。
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