[发明专利]一种番茄侧枝发生的调控方法

说明书

本发明适用于植物基因工程技术领域，提供了一种番茄侧枝发生的调控方法，包括一种番茄SlERF025基因，其核苷酸序列如Seq No.1所示，还包括以下步骤：步骤（1）：番茄SlERF025基因的克隆；步骤（2）：目的基因片段的回收；步骤（3）：将目的基因连接到表达载体；步骤（4）：重组质粒转化大肠杆菌；步骤（5）：农杆菌介导番茄遗传转化。本发明所提供的一种番茄侧枝发生的调控方法为调控植物分枝方面的应用，是将SlERF025基因利用根癌农杆菌介导的方式转入番茄植株，观察转基因植株与野生型植株的表型差异并进行对比和生理指标的测定，同时研究该基因对植物分枝的控制，探索关于调控植物分枝的新方法。

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种番茄侧枝发生的调控方法。

背景技术

随着经济的迅速发展与技术的不断更新，人们对蔬菜水果等园艺作物的需求与品质要求也日益增高，同时番茄(Solanum lycopersicum)作为餐桌上最常见的几种蔬菜之一，因具有比较独特的口感与很高的营养价值，一直深受群众喜爱，且其品种也不断进行优化改良。影响番茄产量的因素有许多，传统农业常常通过改进种植技术，如提供肥厚的土壤、适宜的温度光照、充足的水分肥料、合理的修剪方式等，获得更高品质与产量的番茄。

分枝的数量是决定植物株型的重要农艺性状，并且植物分枝的数量角度与植物产量的形成以及对逆境的抵抗强弱方面有着不可分割的联系，分枝的数目影响植物的经济指标，改变番茄分枝数目，对今后改良番茄株型和提升番茄产量具有重要意义。

分枝数目受到遗传、环境、植物激素等因素的影响，植物分枝是一个重要可塑的植物发育过程。植物的分枝来源于叶片的叶腋处，首先在叶腋处形成腋芽，然后激活产生分枝。随着分子生物学的不断发展，已经可以从分子层面对分枝机理进行研究，迄今为止，在拟南芥、水稻等模式作物中都分离鉴定出与分枝有关的基因。

ERF(Ethylene-responsive factor)是一类广泛存在于植物中具有AP2特征结构域的乙烯应答转录因子，能与GCC-box(保守序列为AGCCGCC)特异性结合，在乙烯响应中发挥着重要的作用。随着对ERF转录因子不断深入研究发现，ERF转录因子在植物生长发育过程主要与非生物逆境胁迫有关系，但在分枝方面研究较少。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种番茄侧枝发生的调控方法，旨在解决上述问题。

本发明实施例是这样实现的，一种番茄侧枝发生的调控方法，包括以下步骤：

(1)番茄SlERF025基因的克隆，番茄SlERF025基因的核苷酸序列如Seq No.1所示；

(2)目的基因片段的回收；

(3)将目的基因连接到表达载体；

(4)重组质粒转化大肠杆菌；

(5)根癌农杆菌介导遗传转化。

进一步的技术方案，所述步骤(1)的具体操作步骤如下：

取野生型番茄植株叶片的总RNA，反转录出cDNA的第一条链，以获得的cDNA为模板，扩增全长，引物为：

SlERF025-L：TACGAACGATACTCGACCCCATGGCTGCTTATCATTTTAATG，SlERF025-R:CTAGAGTCGACGGATCCCCCTGGATAACCCCAGAGACTATCT进行PCR扩增(20μL)。

进一步的技术方案，所述步骤(2)的具体操作步骤如下：

a.将上一步骤中的PCR产物在150V电压条件下进行琼脂糖凝胶电泳；