[发明专利]一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法

说明书

本发明提供了一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法，包括以下步骤：S1、采集可口革囊星虫腔液；S2、从腔液中分离出腔液细胞；S3、将提取液加入腔液细胞，混匀并使细胞完全裂解，裂解液离心，取上清液离心，去除沉淀及杂质，得到抗菌物质抽提液；S4、将抽提上清液用沸水浴处理，离心去除不耐热的蛋白及杂质沉淀，得到抗菌物质纯化液；S5、对抗菌物质纯化液用透析液进行透析，透析后进行离心超滤浓缩，得到可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质。本发明方法得到的抗菌活性物质广谱抗菌，且具有很强的耐热性，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及抗菌活性物质提取技术领域，尤其涉及一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法。

背景技术

天然产物是人类药物的重要来源，据统计目前超过50％的药物均直接或间接来源于天然产物。海洋生物的生存环境和代谢产物与陆地生物不同，产生并积累了大量具有特殊化学结构和生理活性的物质。因此，海洋生物成为寻找和发掘新的生物活性物质及药物的巨大宝库。截止目前已经发现具有抗肿瘤、抗病毒、抗心血管疾病、增强免疫系统等活性的海洋生物活性物质5000余种。天然抗菌物质在药物残留及细菌耐药性方面比传统抗生物类药物具有显著的优势，使其在药物开发、临床治疗、食品防腐及饲料添加剂等领域应用前景广阔。

可口革囊星虫(Phasolosma esculenta)俗称海丁、海蚂蝗、泥丁、土笋等，隶属星虫动物门(Sipuncula)、革囊星虫纲(Phascolosomatidea)、革囊星虫目(Phascolosomaliformes)、革囊星虫科(Phascolosomatidae)、革囊星虫属(Phascolosoma)，主要分布于浙江、福建沿海等地，是我国特有物种，常供食用。可口革囊星虫营养丰富，常加工成“沙虫干”和“土笋冻”等海珍品，具有滋阴降火、补肾益智的功效，被誉为“动物洋参”及海中的“冬虫夏草，”深受国内外消费者欢迎。除此之外，可口革囊星虫还含有胶原蛋白、蚯蚓血红蛋白、精氨酸磷酸转移酶、章鱼碱脱氧酶、牛磺酸等多种活性物质。由此可见，可口革囊星虫作为一种重要的海洋生物资源具有极大研究价值及资源开发利用潜力。

研究发现可口革囊星虫的腔液具有抗菌活性，但目前对于其提取制备方法研究较少，用现有技术提取的腔液不耐热，稳定性差，容易失活，且抗菌谱较窄，导致抽提得到的抗菌活性物质的应用前景大大受到限制。

发明内容

本发明所要解决的问题是如何提高可口革囊星虫腔液抗菌活性物质的抗菌能力和耐高温能力。

为解决上述技术问题，本发明提供一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法，包括以下步骤：

S1、采集可口革囊星虫腔液；

S2、从腔液中分离出腔液细胞；

S3、将提取液加入腔液细胞，混匀并使细胞完全裂解，裂解液离心，取上清液离心，去除沉淀及杂质，得到抗菌物质抽提液；

S4、将抽提上清液用沸水浴处理，离心去除不耐热的蛋白及杂质沉淀，得到抗菌物质纯化液；

S5、对抗菌物质纯化液用透析液进行透析，透析后进行离心超滤浓缩，得到可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质。

相对于现有技术，本发明对可口革囊星虫的腔液进行有效利用，变废为宝，有利于节约资源和保护环境；本发明的步骤简单，易于操作，可重复性强，能高效提取腔液中的抗菌活性物质；抽提得到的抗菌活性物质广谱抗菌，且具有很强的耐热性，具有很好的应用前景。

进一步地，所述步骤S4具体包括：将步骤S3获得的抽提上清液在100℃沸水浴处理5-10min，常温下离心10-15min，离心机转速为12000-15000rpm/min，除去不耐热的蛋白和其他杂质沉淀，取上清液得到抗菌物质抽提液。该步骤将抽提上清液进行沸水浴处理，能高效除去腔液中不耐热的蛋白，提高抗菌活性物质的耐热性能。