[发明专利]一种高紫杉醇含量的红豆杉发酵液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将红豆杉叶片和/或树皮与水混合后，经打浆制成红豆杉浆体；

(2)将红豆杉浆体经微波处理后，加入复合酶，在厌氧条件下，酶解处理6-8天，制得微波-酶解处理红豆杉浆体；

(3)在微波-酶解处理红豆杉浆体中加入碳源、有机酸、无机盐和凝结芽孢杆菌，于45～60℃条件下，发酵5-10天，当pH为3.8-4时，结束发酵，制得第一次发酵红豆杉浆体；

(4)在第一次发酵红豆杉浆体中加入碳源、氮源、有机酸和复合菌种，搅拌均匀，于常温下，发酵7-15天，pH为3-3.3时，结束发酵，制得第二次发酵红豆杉浆体，再经灭菌，取上清液，制得高紫杉醇含量的红豆杉发酵液。

2.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，在步骤(4)之前将第一次发酵红豆杉浆体和发酵红豆杉浆果混合为浆体，然后再进行步骤(4)操作。

3.根据权利要求2所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，发酵红豆杉浆果通过将红豆杉果与水打浆制成红豆杉浆果，再加入碳源、果胶酶和复合菌种，发酵15-30天，制得。

4.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，步骤(2)中微波处理温度为35-55℃，时间为0.5-2min，次数为1-5次。

5.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，步骤(2)中复合酶是由单宁酶与以下5种酶中至少两种混合而成，这5种酶分别为：纤维素酶、半纤维素酶、菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶和淀粉酶。

6.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，步骤(3)中凝结芽孢杆菌质量为微波-酶解处理红豆杉浆体质量的0.5-2％。

7.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中复合菌种是由酵母菌和巴氏乳杆菌与以下7种菌中至少1种混合而组成，这7种菌分别为：枯草芽胞杆菌、植物乳杆菌植物亚种、类干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、嗜热链球菌、戊糖乳杆菌和唾液乳杆菌。

8.根据权利要求1所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法，其特征在于，步骤(4)中复合菌种质量为第一次发酵红豆杉浆体质量的0.1-0.6％。

9.权利要求1-8任一项所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液的制备方法制得的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液。

10.权利要求9所述的高紫杉醇含量的红豆杉发酵液在制备抑制肿瘤药物方面的应用。