[发明专利]一种靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于， 所述双异性嵌合抗原受体从N端到C端顺次包括信号肽CD8、靶向HIV-1 gp120蛋白共受体结合位点的识别单元单域抗体m36.4、连接肽3×G₄S、靶向HIV-1 gp120其它结合位点的识别单元突变型CD4 D1结构域、铰链和跨膜区CD28、一个或多个共刺激信号域CD28和4-1BB和胞内信号传导结构域CD3ζ；编码上述双特异性嵌合抗原受体的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述双特异性嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。

2.一种载体，其特征在于，所述载体能够表达权利要求1所述靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体，所述载体包含SEQ ID NO.8所示核苷酸序列。

3.一种基因工程化T淋巴细胞，其特征在于，所述T淋巴细胞

包含权利要求2所述载体，并且可以表达靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体。

4.权利要求3所述基因工程化T淋巴细胞的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：将权利要求1所述靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体编码序列连接到载体上，包装获得慢病毒颗粒，利用该慢病毒感染T淋巴细胞从而获得双特异性嵌合抗原受体修饰的T淋巴细胞。

5.权利要求1所述一种靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体在制备治疗或预防艾滋病药物方面的应用。

6.权利要求1所述靶向HIV-1病毒囊膜蛋白的双特异性嵌合抗原受体的制备方法，其具体步骤如下所示：将分别编码靶向HIV-1 gp120蛋白共受体结合位点的识别单元、连接肽、靶向HIV-1 gp120其它结合位点的识别单元、铰链和跨膜区、共刺激信号域和胞内信号传导结构域的核苷酸序列按5’至3’方向顺次串联，利用基因合成克隆至空白慢病毒表达载体pKL上，从而获得表达双特异性嵌合抗原受体的慢病毒质粒。