[发明专利]一种杭白菊总黄酮的提取方法

权利要求书

1.一种杭白菊总黄酮的提取方法，其特征在于所述方法按如下步骤进行：

（1）预处理：取杭白菊烘干、粉碎，得杭白菊粉末；将杭白菊粉末加入体积浓度50-70%的乙醇水溶液中，在室温下搅拌充分溶胀，调节温度45~65℃之间，pH值在4.0~5.5之间，添加纤维素酶并酶解30-60min，获得酶解后的物料；

（2）连续动态逆流提取：采用罐组式动态提取，将步骤（1）酶解后的物料平均加入各个罐中，以体积浓度50-70%乙醇水溶液为溶剂，每罐于40~60℃、40-100rpm提取3次，每次30-40min，收集每罐第一次提取液，获得逆流提取液；

（3）膜分离：将步骤（2）逆流提取液减压浓缩回收乙醇，离心，取上清液，依次进行微滤、超滤，得到滤过液；所述微滤采用孔径0.2~0.45μm的聚砜膜或磺化聚砜膜，在40~50℃下进行微滤；所述超滤采用孔径5-10nm的聚醚砜膜或聚砜膜，在温度35~45℃、压力0.1-0.5Mpa下进行超滤；

（4）去除农药残留：采用LS-806B树脂进行柱层析分离，将步骤（3）滤过液以2-4BV/h的速度上样，用体积浓度30%-70%甲醇水溶液进行梯度洗脱，洗脱速度1-3BV/h，洗脱量为8-10BV，收集黄酮质量含量10%的洗脱液，减压浓缩至甲醇体积浓度5%，获得去除农药残留的浓缩液；

（5）柱层析：将步骤（4）制备的浓缩液，以2-4BV/h的速度上样大孔吸附树脂层析柱，吸附完成后，先用水洗至下注液接近无色，弃去水洗液，再用体积浓度60-70%乙醇水溶液洗脱，洗脱速度1-3BV/h，洗脱量8-10BV，收集乙醇洗脱液，减压浓缩至干，获得杭白菊总黄酮；所述大孔吸附树脂型号为ADS-7、AB-8、LK001、聚酰胺或者D-101。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）所述杭白菊粉末是将杭白菊在105℃下烘焙2~4h，粉碎，过80~120目筛，得杭白菊粉末。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（1）所述50-70%乙醇水溶液体积用量以杭白菊粉末质量计为6-12mL/g；所述纤维素酶酶活为10000U/g，所述纤维素酶质量添加量为杭白菊粉末重量的0.1-0.3%。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（2）体积浓度50-70%乙醇水溶液体积用量以步骤（1）杭白菊粉末重量计为6-12mL/g。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤（4）梯度洗脱用甲醇水溶液体积浓度为30%、40%、50%、60%和70%。