[发明专利]一种敌百虫半抗原及其制备方法、抗原、抗体及其应用在审
申请号: | 202111299579.2 | 申请日: | 2021-11-04 |
公开(公告)号: | CN113896743A | 公开(公告)日: | 2022-01-07 |
发明(设计)人: | 杨星星;周佳;付辉;李澍才;李道霞;姚欢;余晓琴;王炳志;马涛;杨国伟 | 申请(专利权)人: | 深圳市易瑞生物技术股份有限公司;四川省食品检验研究院 |
主分类号: | C07F9/40 | 分类号: | C07F9/40;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/548;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/58 |
代理公司: | 北京汇知杰知识产权代理有限公司 11587 | 代理人: | 杨巍;柴春玲 |
地址: | 518101 广东省深圳市宝安区新*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 敌百虫 半抗原 及其 制备 方法 抗原 抗体 应用 | ||
1.一种敌百虫半抗原,其特征在于,所述敌百虫半抗原的结构式如式(I)所示:
其中,所述R1选自C0-C6亚烷基;所述R2选自C1-C6亚烷基;
优选地,所述敌百虫半抗原具有如式(I-1)所示的结构:
2.一种用于制备权利要求1所述的敌百虫半抗原的中间体,其结构式如式(II)所示:
其中,所述R1选自C0-C6亚烷基;
优选地,所述中间体具有如式(II-1)所示的结构:
3.一种制备权利要求1所述的敌百虫半抗原的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
步骤1:在低温下,使三氯化磷与结构式为的化合物1反应,经减压蒸馏后得到中间体1:
其中,R1选自C0-C6亚烷基;
优选地,三氯化磷和化合物1的摩尔比为1:(1-1.1);
步骤2:在低温下,使所述中间体1在碱性条件下与无水甲醇和吡啶反应,得到中间体2:
优选地,所述中间体1、无水甲醇和吡啶的摩尔比为1:1:(2-5);
步骤3:在缚酸剂条件下,使所述中间体2与三氯乙醛反应,得到中间体3:
优选地,所述中间体2、三氯乙醛和缚酸剂的摩尔比为1:(1-1.2):(1-3);
优选地,所述缚酸剂选自有机碱,所述有机碱选自三乙胺、二乙胺、N,N-二异丙基乙胺、4-二甲氨基吡啶、1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯、四甲基乙二胺和吡啶中的至少一种;
步骤4:使所述中间体3与结构式为的化合物2在引发剂的存在下进行反应,得到式(I)所示的敌百虫半抗原:
其中,R2选自C1-C6亚烷基;
优选地,所述中间体3、化合物2和引发剂的摩尔比为1:(1-2):(0.1-0.3);
优选地,所述引发剂为安息香双甲醚、和/或偶氮二异丁腈。
4.一种敌百虫抗原,所述敌百虫免疫抗原包含:权利要求1所述的敌百虫半抗原、以及与所述敌百虫半抗原偶联的载体蛋白。
5.根据权利要求4所述的敌百虫抗原,其特征在于,所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或血蓝蛋白。
6.一种敌百虫抗体,其特征在于,所述敌百虫抗体为特异性针对权利要求4或5所述的敌百虫抗原的抗体;
优选地,所述敌百虫抗体为敌百虫单克隆抗体或敌百虫多克隆抗体。
7.权利要求1所述的敌百虫半抗原、权利要求4或5所述的敌百虫抗原、权利要求6所述的敌百虫抗体在敌百虫免疫学检测中的应用。
8.一种敌百虫胶体金层析检测装置,其特征在于,所述敌百虫胶体金层析检测装置包括试纸条和反应杯,其中,所述试纸条包括反应膜,所述反应膜上有检测线和质控线,所述检测线包被有权利要求4或5所述的敌百虫抗原,所述反应杯中含有胶体金标记的权利要求6所述的敌百虫抗体。
9.一种检测样品中敌百虫的方法,所述方法包括:使权利要求8所述的胶体金层析检测装置与样品接触。
10.根据权利要求9所述的方法,所述的样品为蔬菜、水果、可食动物组织、水或土壤。
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