[发明专利]新型冠状病毒中和抗体检测卡及制备方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒中和抗体检测卡，其特征在于，包括PVC衬垫以及设置于所述PVC衬垫上的、依次连接的样品垫、荧光垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫；

其中，所述荧光垫上设有荧光微球标记的新型冠状病毒重组蛋白和荧光微球标记的独立质控系统，所述独立质控系统为血蓝蛋白；

所述硝酸纤维素膜上设置有检测区和质控区，所述检测区包被有ACE2蛋白，所述质控区包被有抗血蓝蛋白抗体；

所述独立质控系统的血蓝蛋白和所述质控区的抗血蓝蛋白抗体可进行互换。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡，其特征在于，所述新型冠状病毒重组蛋白为S蛋白受体结合域。

3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡，其特征在于，所述硝酸纤维素膜贴合于所述PVC衬垫的中间部位，所述荧光垫和吸水垫分别搭接于所述硝酸纤维素膜两端的上表面，所述样品垫搭接于所述荧光垫的上表面，搭接重叠部分均设置在1-3mm。

4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡，其特征在于，所述荧光微球的固含量为0.1%-5%，粒径为100-300nm。

5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡，其特征在于，所述PVC衬垫的宽度设置为3-5mm。

6.一种新型冠状病毒中和抗体检测卡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：荧光垫和样品垫制备，将玻璃纤维或聚酯膜进行预处理并烘干待用；

步骤二：荧光标记新型冠状病毒重组蛋白；

步骤三：荧光标记独立质控系统；

步骤四：将步骤二荧光标记的新型冠状病毒重组蛋白和步骤三荧光标记的独立质控系统按照1:1的比例混匀得到荧光标记物，待用；

步骤五：将步骤四的所述荧光标记物喷涂于所述荧光垫上；

步骤六：将抗血蓝蛋白抗体和ACE2蛋白分别进行稀释后包被于硝酸纤维素膜上，分别形成质控区和检测区；

步骤七：将步骤六形成的硝酸纤维塑膜贴于PVC衬板的中间，步骤五形成的荧光垫搭接于所述硝酸纤维塑膜的一端，将步骤一形成的样品垫搭接于所述荧光垫远离硝酸纤维塑膜的一端，将吸水垫搭接于所述硝酸纤维塑膜的另一端；

步骤八：试纸条切割。

7.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡的制备方法，其特征在于，所述步骤二中，荧光标记新型冠状病毒重组蛋白包括以下流程：

流程一：微球清洗，取100ul荧光微球加入900ul活化液，用移液器吹打混匀，离心弃上清，加入1ml活化液备用；

流程二：微球活化，加入2.5ul EDC及2.5ul NHS于流程一溶液中，室温活化15min，离心弃上清，加入1ml偶联液备用；

流程三：微球偶联，于流程二溶液中加入新型冠状病毒重组蛋白200-500ug，室温反应1h；

流程四：封闭，于流程三溶液中加入100ul封闭液，室温反应1h，离心弃上清；

流程五：复溶，于流程四溶液中加入3-5ml复溶液复溶。

8.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡的制备方法，其特征在于，所述步骤三中，荧光标记独立质控系统包括以下流程：

流程一：微球清洗，取100ul荧光微球加入900ul活化液，用移液器吹打混匀，离心弃上清，加入1ml活化液备用；

流程二：微球活化，加入2.5ul EDC及2.5ul NHS于流程一溶液中，室温活化15min，离心弃上清，加入1ml偶联液备用；

流程三：微球偶联，于流程二溶液中加入血蓝蛋白 200-500ug，室温反应1h；

流程四：封闭，于流程三溶液中加入100ul封闭液，室温反应1h，离心弃上清；

流程五：复溶，于流程四溶液中加入3-5ml复溶液复溶。

9.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测卡的制备方法，其特征在于，步骤五中，所述荧光标记物喷涂于所述荧光垫上，喷涂量为3-8ul/cm。