[发明专利]新型冠状病毒中和抗体检测卡及制备方法

说明书

本发明涉及一种新型冠状病毒中和抗体检测卡，包括PVC衬垫以及设置于所述PVC衬垫上表面、依次连接的样品垫、荧光垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫；其中，荧光垫上设有荧光微球标记的新型冠状病毒重组蛋白和荧光微球标记的独立质控系统，所述独立质控系统为血蓝蛋白；硝酸纤维素膜上设置有检测区和质控区，检测区包被有ACE2蛋白，质控区包被有抗血蓝蛋白抗体；独立质控系统的血蓝蛋白和质控区的抗血蓝蛋白抗体可进行互换。本发明所提供的检测卡，其质控区的检测结果不受检测区检测物质影响，检测区检测结果与质控区无交叉影响，可以使新型冠状病毒中和抗体的检测结果更为准确、重复性更佳。

技术领域

本发明涉及免疫检测领域，特别涉及一种新型冠状病毒中和抗体检测卡及制备方法。

背景技术

新型冠状病毒，也称 2019-nCoV，是一种可导致呼吸系统疾病的病毒。此病毒可引起炎症及肺部气道内粘液和体液积聚（肺炎）。冠状病毒有多种类型，大多数类型仅感染动物，但有时会发生变异并感染人类。

新型冠状病毒肺炎疫情已成为全球性重大的公共卫生事件，多位专家认为，全球新冠流行的最终控制，要依赖新冠疫苗接种及机体产生对新冠病毒具有高效免疫力的抗体——中和抗体。

而目前，检测中和抗体的黄金试验标准，要求在生物安全三级防护实验室里处理新冠活病毒，而且非常耗时，通常要2天到4天才能完成。基于假病毒的病毒中和试验，被认为是另一种检测中和抗体的方法，其可以在生物安全二级实验室操作，但仍需使用活病毒和细胞。目前也有采用基于免疫层析技术的检测卡检测方式，其质控区（C）包被羊抗鼠抗体，因样本中HAMA（人抗鼠抗体）的影响，导致不同样本测试时C线测试值偏差较大，T/C干扰严重，且与C线结合的荧光微球标记的2019-nCoV Spike Protein（RBD）为未与ACE2结合的剩余部分，会造成双倍干扰，从而导致重复性变差。

为了更好地监测感染率、群体免疫和保护性免疫，以及评价临床试验期间和大规模接种后的疫苗效力，亟须一种能稳定可靠的检测新冠病毒中和抗体的快速试验。

发明内容

本发明提供了一种新型冠状病毒中和抗体检测卡及制备方法，以解决现有技术中检测中和抗体耗时长、操作复杂且不适于大规模检测的问题，同时克服检测结果偏差大、不准确的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种新型冠状病毒中和抗体检测卡，包括PVC衬垫以及设置于所述PVC衬垫上的、依次连接的样品垫、荧光垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫；其中，所述荧光垫上设有荧光微球标记的新型冠状病毒重组蛋白和荧光微球标记的独立质控系统，所述独立质控系统为血蓝蛋白；所述硝酸纤维素膜上设置有检测区和质控区，所述检测区包被有ACE2蛋白，所述质控区包被有抗血蓝蛋白抗体；所述独立质控系统的血蓝蛋白和所述质控区的抗血蓝蛋白抗体可进行互换。所述新型冠状病毒重组蛋白为S蛋白受体结合域。

作为优选方案，所述硝酸纤维素膜贴合于所述PVC衬垫的中间部位，所述荧光垫和吸水垫分别搭接于所述硝酸纤维素膜两端的上表面，所述样品垫搭接于所述荧光垫的上表面，搭接重叠部分均设置在1-3mm。

作为优选方案，所述荧光微球的固含量为0.1%-5%，粒径为100-300nm。

作为优选方案，所述PVC衬垫的宽度设置为3-5mm。

本发明进一步提供了一种新型冠状病毒中和抗体检测卡的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：荧光垫和样品垫制备，将玻璃纤维或聚酯膜进行预处理并烘干待用；

步骤二：荧光标记新型冠状病毒重组蛋白；

步骤三：荧光标记独立质控系统；

步骤四：将步骤二荧光标记的新型冠状病毒重组蛋白和步骤三荧光标记的独立质控系统按照1:1的比例混匀得到荧光标记物，待用；

步骤五：将步骤四的所述荧光标记物喷涂于所述荧光垫上；